Ovaj dokument je automatski prepoznat. U bloku s desne strane možete pronaći skeniranu kopiju. Radimo na ručnom prepoznavanju dokumenata, ali to je herkulov zadatak i oduzima puno vremena. Ukoliko nam želite pomoći i ubrzati obradu dokumenata, to uvijek možete učiniti tako da nam donirate manji iznos novca.

GOST 13496.4-93

MEĐUDRŽAVNI STANDARD

STOČNA HRANA, KRMNA SMJEŠA, SIROVINE KRMNE SMJEŠE

Metode određivanja sadržaja dušika i sirovih bjelančevina

Službena objava

Moskva Standardinform 2011

GOST 13496.4-93 Predgovor G RAZVIO Gosstandart Rusije

UVODI Tehničko tajništvo Međudržavnog vijeća za normizaciju. megrologija i certifikacija

2 DONIJELO Međudržavno vijeće za normizaciju. Mjeriteljstvo i certifikacija 21.10.1993

Naziv državnog laretva Naziv nainchiyalykno alprliz o standardizaciji

Republika Kirgistan Kiri Republika Mollova Mollovastanlari Roskiy Foleraniya Gosstanlart Rusije

Republika Tazhikistan Tazzhikgosstanoar1 Turmenistan Main Tokhularetnaya Inupecation of Gurkmenistan Ukraine Gosstanaart of Ukraine

3 Rezolucija Odbora Ruske Federacije za standardizaciju. mjeriteljstvo i certificiranje od 12.06.94 br. 160 međudržavni standard GOST 13496.34 93 odmah stupio na snagu kao državna agencija Federacije Roseni od 01.01.95.

4 UMJESTO GOST 1346.4 84

> PONOVNO IZDANJE. ožujka 201

I standardi. 1993. godine

Ovaj međunarodni standard može se reproducirati u dijelovima ili djelomično. umnožavati i distribuirati na teritoriju Ruske Federacije kao službena publikacija bez dopuštenja Savezne agencije za tehničku regulaciju i mjeriteljstvo

UDK 636.085:546.17.06:006.354 Grupa C19

MEĐUDRŽAVNI STANDARD

STOČNA HRANA, KRMNA SMJEŠA, SIROVINE KRMNE SMJEŠE GOST

Metode određivanja sadržaja dušika i sirovih proteina

Foddec. iskopane sirovine stočne hrane i stočne hrane. Metode određivanja dušika i sirovih bjelančevina

MKS 65.120 OKSTU 9119

Datum uvođenja 1995-01-01

Ovaj standard se proteže na sve feedove. krmne smjese i sirovine (osim mineralnog podrijetla, stočni kvasac i paprina) i utvrđuje titrimetrijske (prema Käsldaluru i fotometrijske metode za određivanje sadržaja bjelančevina s naknadnim preračunavanjem rezultata Ha sirove bjelančevine.

1 Uzorkovanje Uzorkovanje prema GOST 13496.0. GOST 1356.3. GOST 13979.10. GOST 27262.

2 Titrimetrijska metoda za određivanje dušika po Kjeldahlu (glavna metoda)

Suhoća metode sastoji se u razgradnji organske tvari uzorka kipućom koncentriranom sumpornom kiselinom uz stvaranje amonijevih soli. pretvaranje amonijaka u amonijak, njegova destilacija u kiselu otopinu, kvantificiranje amonijaka titrimetrijskom metodom i izračunavanje sadržaja dušika u materijalu koji se proučava.

2.1 Uređaji. materijala i reagensa

Laboratorijske vage 2. razreda točnosti prema GOST 24104* s najvećom granicom vaganja - 240 g.

Laboratorijske vage 4. razreda točnosti prema GOST 24 IZ s najvećim kapacitetom vaganja MN) g ili druge vage iste klase točnosti.

Rezač slame marke ISR-[ ili drugih marki.

Sušilica za uzorke hrane marke SK-[G ili laboratorijska sušionica s greškom u održavanju temperature ne većom od 5 °C.

MRI-2 za male laboratorije ili druge marke.

Sito s rupama promjera D mm.

Električni grijači ili plinski plamenici.

Instalacija tipa Kjellal ili uređaj za uklanjanje amonijaka parom (vidi sliku 2).

Budući da je tiyuan 214) uključen u GOST 24 IN - 2001. U Ruskoj Federaciji Istok? GOSTR 53228 - MN\U sass u daljnjem tekstu).

Izlaine službeni

GOST 13496.4-93

i kalaa vysstimoe prema INN kapelnan lijevcima s uključivanjem GAO ​​hmm 7 hapleulonitel. U rashladnoj sobi. 5 prijemni poziv EMCO TE MCN TER? je um. 4 odvojivi CTD TTR, t - KAD. Wat qe hare OH

JACK C Pe TOPO TON paTy pe. WAM Pa tosaa plamenik

Ee crtež |

1 tikvica; 2 | kalasulovitsl. Kronična tikvica. A, 3. stoljeće. G.H dizalice. 10

Slika 2

GOST 13496.4-93

Kapaljka za indikator.

Instalacija za titraciju biretom 2. klase točnosti kapaciteta 19. 25 ili 50) u skladu s GOST 29252.

Porculanski tarionik i tučak prema GOST 9147.

Kjellal tikvice kapaciteta NU. 250 ili 500 cm'.

Epruvete od stakla otpornog na toplinu zapremine 50–100 cm’ ili tikvice od stakla otpornog na toplinu zapremine 100 cm*.

Stakleni lijevci promjera 2 Zem prema GOST 25336 ili Kjellal čahure.

Konusna tikvica kapaciteta 250 cm’ prema GOST 25346.

Mjerne posude zapremnine 5) i 1000 cm! prema GOST 17.

Mjerni cilindri kapaciteta M) i 1400 cm prema GOST 177).

Pivets s blagom kapaciteta gi 25 cm? prema GOST 29169.

Porculansko staklo kapaciteta 1000 cm prema GOST 914 $.

Kemijsko staklo kapaciteta 50 cm' prema GOST 25336.

Azbestne ploče.

Supstance. sprječavanje izbacivanja tekućine: komadići firfora. staklene perle. svježe smotane komade plovućca.

Koncentrirana sumporna kiselina prema GOST 4204. x. žličica.. žličica. A. i standardni titar otopine sumporne kiseline 0,05 mol/am" (0.Yon.).

Kalijev sulfat prema GOST 4145, x. h.. h.d.a.

Kalijev persulfat prema GOST 4146. h.l.a.

Sulfatna kreda, 5-valna, prema GOST 4165. h.l.a.x. h.

Natrijev sulfat, bez valova prema GOST 4166. analitički stupanj.

Volorol peroksid prema GOST NU929. valna otopina s masom loley 30 “&.

Borna kiselina prema GOST 9656. analitički stupanj.

Natrijev hidroksid prema GOST 4338. x. analitički stupanj ili valovita otopina s masenim udjelom od 33 4“: G mol otopina natrijevog hidroksida, pripremljena prema GOST 25794.1.

Rektificirani etilni alkohol prema GOST 5962®.

metil crveno.

Metil plavo ili bromokrezol zeleno.

Destilirani volovi prema GOST 6709.

Bilješka. Dopušteno je koristiti GIADA EY Ps. crni pasuau i grančica sredstva za mjerenje. imaju iste ili bolje mjeriteljske karakteristike.

2.2 Priprema za ispitivanje

2.21 Priprema uzoraka za ispitivanje

Uzorak sijena srednje dobi. silaža, sjenaža. slama, zelena hrana itd. sjeckaju se na komade duge 1 zemlje; Korjenasto povrće i bobice se režu na ploške (ploške) debljine oko 0,5 cm Megol četvrtina se reže na dio srednjeg uzorka. čija masa nakon sušenja mora biti najmanje 50 g suši se u sušioniku na temperaturi od 60-69 °C do suhog stanja na zraku.

Nakon sušenja, puffy-dry uzorak se melje u laboratorijskom mlinu i prosijava kroz sito. Usitnjeni ostatak na situ nakon ručnog usitnjavanja škarama ili u mužaru dodaje se prosijanom dijelu i dobro promiješa.

Zreli uzorak krmne smjese i krmnih sirovina melje se i prosijava bez prethodnog sušenja.

Uzorci pripremljeni za ispitivanje čuvaju se u staklenoj ili plastičnoj posudi s brušenim čepom (poklopcem) na suhom mjestu.

Analiziraju se uzorci venske hrane bez preliminarne polusezonske hranidbe.

2.2.2 Priprema reagensa i otopina

2.2.21 Priprema miješanih katalizatora

Katalizator Pomiješajte 1 težinski dio krede sumporne kiseline. 100 težinskih dijelova kalijevog sulfata i 2 težinska dijela selena. Čisto usitnite u mužaru da dobijete fino zrnati prah.

Katalizator 2. Pomiješajte 1) masenih dijelova kreda sulfata i 10 težinskih dijelova kalijevog sulfata. Temeljito samljeti u mužaru kako bi se dobio fino zrnati prah.

* U Ruskoj Federaciji koristi se GOST 51652-ZHI

GOST 13496.4-93

Kod pripreme katalizatora [i 2, dopušteno je zamijeniti kalijev sulfat s kalijevim sulfatom ili natrijevim sulfatom u istoj količini.

2.2.2.2 Priprema otopine sumporne kiseline koja sadrži sedum

Amorfni ili mljeveni selen. na bazi 9 g ni) am’ kiseline. otopiti uz zagrijavanje 1 koncentrirane sumporne kiseline u tankoj tikvici za obezbojenje.

2.223 Redukcija otopine sumporne kiseline s Cf ASOD = 0,05 (O.P

Koristite standardnu ​​sumpornu kiselinu. Rješenja se pripremaju u skladu s pravilima. uključeno u komplet.

Dopušteno je pripremiti otopinu sumporne kiseline s (/N,5O.) = 9,0 iz koncentrirane sumporne kiseline u skladu sa zahtjevima GOST 25794.1.

2.2.24 Priprema otopine borne kiseline masene koncentracije 34“

40 g borne kiseline se uz zagrijavanje otopi u maloj količini tople vode i prenese u tikvicu zapremine 1000 cm2. Nakon hlađenja, volumen će biti jednak 1 cm* s vodom.

2.2.25 Pričvršćivanje indikatora

Pri titraciji se koristi olin iz sljedećih inlikatora:

indikator | otopiti 0,20 g metil crvenog i 0,10 g metilenskog modrila u 100 cm3: 96 g otopine etilnog alkohola:

indikator 2 pomiješati 3 volumena 0.) otopine bromokrezol zelenila u etilnom alkoholu i | volumen 0,2 “&-te otopine metilcrvenila u etilnom alkoholu. Inlikagore čuvajte u tamnoj boci.

2.2.26 Priprema otopine natrijevog hidroksida mase Sol 33

330 gil oksida pagrije otopljeno je u porculanskoj čaši od 670 cm' listilirane vode.

2.2. Priprema otopine natrijevog hidroksida s

sova bolesna 40%

3400 g natrijeva hidrogenoksida otopi se u porculanskoj čaši u 60 cm' destilirane vode.

24 Provođenje testa

2.4.1 Priprema

U dugoj suhoj epruveti. slobodno pljusnuti Kjellalovu bocu niz grlo. vagati 0,7 Lt hrane biljnog podrijetla. mješovita hrana 0,3 0. t životinjskog brašna ili 0,4 0,5 garozhei s pogreškom ne većom od 0,41 g. Umetanje epruvete u Kjellalovu tikvicu do njenog dna. izlijte uzorak i ponovno izvažite epruvetu. Na temelju razlike između prve i druge težine određuje se masa uzorka. uzeti ala analiza. Mineralizacija se provodi na jedan od dva načina:

put |. Dodajte 2 g miješanog katalizatora [ili 8 g katalizatora 2] u Kjellalovu tikvicu. Nakon dodavanja katalizatora, pažljivo dodajte 10 12 jedinica koncentrirane sumporne kiseline, ovisno o težini uzorka;

metoda 2. Dodajte 10 volumena vodene otopine volorol peroksida © 30% mase kao oksidirajući gel u Kjellalovu tikvicu. Nakon prestanka burne reakcije dodaje se ista količina preslikane sumporne kiseline. Za ubrzavanje izgaranja preporuča se koristiti

Sadržaj Kjellal-ove tikvice temeljito se izmiješa laganim kružnim pokretima. osiguravajući potpuno vlaženje uzorka. Tikvica se ovako postavi na grijač. tako da mu je os nagnuta pod kutom od 30 45’ prema vertikali. Mali stakleni lijevak ili rukavac se umetne u grlo tikvice kako bi se smanjilo isparavanje kiseline tijekom mineralizacije. Najprije se tikvica umjereno zagrijava. kako bi se spriječilo nasilno stvaranje pjene.

Tijekom zagrijavanja smjesa se povremeno miješa okretanjem tikvice. Nakon nestanka pjene zagrijavanje se pojačava. dok tekućina ne zavrije stalno. Nanev se smatra normalnim. ako se kiselinske pare koncentriraju bliže sredini grla Kjeldahlove tikvice. izbjegavajući pregrijavanje stijenki tikvice. nije u kontaktu s tekućinom. Ako se koristi otvoreni plamen. tada se takvo pregrijavanje može spriječiti. stavljajući ga na azbestnu ploču s nešto manjim promjerom rupe. nego lnametar tikvice na razini vene.

Nakon što je veining izblijedio (pojavljuje se blago juvenilna nijansa). Grijanje je nastavljeno 30 minuta. Nakon hlađenja mineralizat se kvantitativno prenosi u destilacijsku komoru.

GOST 13496.4-93

pljoska. Isperite Kjellalovu tikvicu 20-30 cm' tri puta. Ukupni volumen otopine u tikvici za destilaciju treba biti 214) 25 cm’.

Dopušteno je izvući otonku izravno iz Kjellal-ove tikvice. U ovom slučaju, ala miperalizacija, koristi se Kjellal tikvica kapaciteta UI) cm’. Destilacijom amonijaka, mineralni anzat se razrjeđuje sa 15% 200 cm’ listtiliranih volova.

Kod provođenja ekspresne analize u tvornicama stočne hrane i tijekom žetve zeljaste krme koristi se sljedeća metoda pripreme mineralizata.

Vagani dio ispitnog uzorka mase 0,2. Stavite 0,3 g u Kjellalovu tikvicu ili epruvetu. ili u staklenoj tikvici otpornoj na toplinu. 4 jedinice se dodaju u izvaganu tikvicu. a u epruvetu - 3 cm* valne otopine vodikovog peroksida masene koncentracije 30 “&. Nakon 1,5 2 minute u tikvicu se doda 5 komada. a u epruvetu 22 cm’ koncentrirane sumporne kiseline. koji sadrži selen. kuhano ali 2.2.2.2. Sadržaj tikvice ili epruvete temeljito se promiješa kako bi se osiguralo potpuno vlaženje uzorka. Tikvica ili epruveta s uzorkom stavlja se na električni grijač i zagrijava do točke vrenja. Zatim se zagrijavanje pojača i mineralizacija se nastavlja dok otopina potpuno ne dehidrira (20-30 min). Ako rješenje nije bistro. zatim nastavite grijati još 8 minuta ili ohladite. dodati 0,5 cm' otopine vodikovog peroksida s masenom vezom 30" i Kin-TAT dok potpuno ne promijeni boju. Mineralizat se nakon hlađenja kvantitativno prenese u odmjernu tikvicu obujma 1/2 cm, volumen otopine jednak je volumenu oznake listilovanom vodom i promiješa. 50 cm" otopine mineralizata prenese se u tikvicu.

2.3.2 Destilacija i titracija amonijaka

23.2.1 Destilacija amonijaka u dovod plina

U prihvatnu tikvicu uliti 20 cm3 otopine borne kiseline s propuštenom koncentracijom, 4 i 3 kapi bilo kojeg pomiješanog inlikatora. Tikvica ovako pluta na podu hladnjaka. tako da se njegov vrh uroni u otopinu borne kiseline do dubine ne manje od | vidi.Hladna volova prolazi kroz hladnjak.

Iz destilacijske tikvice u aparaturu za destilaciju amonijaka u staklo s mineralizatom kroz kapajući lijevak oprezno se ulije otopina natrijevog hidroksiloksida masenog udjela 33"&. Lijevak se ispere 2 3 puta sa 10 15 cm: destilirane vode. ostavljajući malu količinu vode kao brtvilo. Dopušteno je dodati otopinu natrijevog til oksida prije pričvršćivanja tikvice za destilaciju na aparaturu. U tu se smjesu u destilacijsku tikvicu uz stijenku ulije otopina natrijevog hidroksida. pazeći da se ne pomiješa s mineralizatom. i pričvrstiti ga na aparat za destilaciju amonijaka.

Volumen dodanog natrijevog hidrogen oksida ovisi o volumenu sumporne kiseline. koristi se za pripremu mineralizata. Za svaki kubični centimetar sumporne kiseline koji preostane nakon završetka procesa mineralizacije treba dodati najmanje 3,5 cm otopine natrijevog hidroksida s masenim udjelom 33. Ako je volumen preostale sumporne kiseline teško odrediti, volumen troske izračunava se iz volumena sumporne kiseline. uzeti za mineralizaciju. Dopuštena je prethodna neutralizacija sadržaja destilacijske tikvice otopinom natrijeva vodikovog oksida s masenim udjelom od 40%. pomoću lubona iz inlikatora. Kako biste osigurali uklanjanje amonijaka, dodajte dodatno | cm" otopine natrijevog hidroksida, masa loley 40<.>

Lonac se zagrijava električnim grijačem ili plinskim plamenikom. Otopina u tikvici se zagrijava na sljedeći način. kako bi se osiguralo ravnomjerno vrenje. Dopušteno je provoditi destilaciju vodenom parom. Kako bi se spriječilo oslobađanje amonijaka. Voda u parogeneratoru mora biti napola zakiseljena sumpornom kiselinom do ljubičaste boje kod EP indikatora i po3e - kod inlikagora 2.

Na početku destilacije amonijaka boja otopine u prihvatnoj tikvici postaje zelena. Pri normalnom vrenju, volumen otopine u prihvatnoj tikvici nakon 20-30 minuta obično je 150-200 cm3. Prilikom brze analize vrijeme destilacije se smanjuje na 7 NU min. Conenova destilacija može se odrediti pomoću crvenog lakmus papira. Da biste to učinili, prijemna tikvica se uklanja iz aparata. Nakon što ste prethodno oprali rubove hladnjaka destiliranom vodom, a na pod stavili lakmus papir s tekućim kapljicama listilata. Ako lakmus ne postane plav. destilacija amonijaka je završena. Ako lakmus postane plav. Prihvatna tikvica ponovno se postavlja na dno hladnjaka i destilacija se nastavlja. Nakon što je destilacija završena, prijemna tikvica se spusti i ko-HOH hladnjaka se ispere destiliranom vodom u prijemnu tikvicu. Amonijak iz birete dehidrira se otopinom sumporne kiseline s ("/,N.$O,) = 0,05 mol/lm' dok se boja inikatora ne promijeni iz zelene u ljubičastu pri uporabi inlikatora [i iz zelene u ružičastu kada koristite inlikator 2.

GOST 13496.4-93

3.4.22 Destilacija amonijaka u sumpornu kiselinu

U prihvatnu tikvicu pipetom se ulije 50 cm' otopine sumporne kiseline = = 0,05 mol/am*. Destilacija velutom. navedeno u klauzuli 2.3.2.1. Nakon završene destilacije, sadržaj prihvatne tikvice (višak otopine sumporne kiseline s p = 0,05 mol/lm) hidrira se otopinom natrijevog hidroksida s (MaOH) = 091 mol/lm do promjene boje u zelenu. .

2.4.2.3 Istovremeno s ispitivanjem provest će se kontrolno ispitivanje kontaminacije vode i reagensa amonijakom. isključujući uzimanje dijela hrane.

Volumen sumporne kiseline utrošen za tipizaciju u kontrolnom pokusu tijekom destilacije u bornu kiselinu. ne smije prelaziti 0,5 cm.” Kada se destilira u sumpornu kiselinu, volumen otopine natrijevog hidrogenoksida. potrošiti na titraciju. mora biti najmanje 49,5 jedinica.” Ako se prekorače utvrđeni standardi, identificiraju se i uklanjaju izvori kontaminacije reagensa amonijakom.

24 Obrada rezultata

2.4.1 Maseni udio azota (No) u ispitnom uzorku kao postotak pri destilaciji amonijaka u bornu kiselinu izračunava se pomoću formule

t rae G volumen otopine sumporne kiseline. potrošeno na titraciju ispitivane otopine. cm': „ - volumen otopine sumporne kiseline utrošen tijekom titracije u kontrolnom pokusu. ": K - korekcija titra otopine sumporne kiseline sa SU, H, ZO,) = 0,05 mol/am", ako se priprema iz standardnog titra: (0,0014 mase dušika, ekvivalentno masi sumporne kiselina sadržana u |. cm' otopine = 0,05 t masa uzorka, g. 100 koeficijent pretvorbe u postotke 2.4.2 Maseni udio amonijaka (br.) u ispitivanom uzorku kod destilacije amonijaka u sumpornu. kiselina izračunava se pomoću formule ay - Hrana 100 volumena otopine natrija s (MaOH) = 0,1 mol/am". utrošenog za titraciju otopine sumporne kiseline s = 0,05 u kontrolnom pokusu, cm". otopina natrijevog hidroksida s (MaOH) = 0,1 mol/am", iskorištena za titraciju ispitne otopine sumporne kiseline. K korekcija na titar otopine natrijevog hidroksida s (MaOH)) = 0,1 mol/am" (0,0014 mase dušika .ekvivalentno masi sumporne kiseline sadržane u |.cm' otopini = 0,05 t: težina uzorka: 100 koeficijent pretvorbe u postotke.

Bilješka. Kod izvođenja ekeprese-anaali rezultat je dvostruko veći. takh as lan par polonina volumen mineralizata.

Aritmetički prosjek rezultata dva paralelna određivanja uzima se kao konačni rezultat ispitivanja. Rezultati se računaju na treću decimalu i zaokružuju na drugu decimalu.

2.4.3 Dopuštena odstupanja između rezultata dva paralelna određivanja (i između dva rezultata dobivena pod različitim uvjetima (0) (u različitim laboratorijima, u različito vrijeme, pri radu na različitim uređajima itd.) s vjerojatnošću pouzdanosti od P = 0,95 ne smije prelaziti sljedeće vrijednosti:

d = 0,02+0,03%, D =

fae XY dvije paralelne definicije. “: Xv aritmetička sredina rezultata dva testa. izvodi pod različitim uvjetima. “©.

GOST 13496.4-93

Dopuštene razlike između rezultata paralelnih određivanja i ispitivanja. provodi pod različitim uvjetima. može imati drugačiji izraz. navedeno u regulatornoj i tehničkoj dokumentaciji za ovu vrstu proizvoda.

Najveća pogreška rezultata analize (^,) s jednostranom vjerojatnošću pouzdanosti P = 0,95 izračunava se pomoću formule

Granična pogreška rezultata analize koristi se pri ocjeni kvalitete hrane za životinje.

Dopušteno je provoditi analizu bez paralelnih određivanja ako u seriji ispitnih uzoraka postoje standardni uzorci (RM). U tom slučaju (uz obaveznu selektivnu statističku kontrolu raskola paralelnih definicija), kao rezultat testa uzima se rezultat jedne definicije. ako razlika između masenog udjela dušika reproduciranog i certificiranog u RM (Py) ne prelazi

D = 0,0670,0334,. gle A, pridruženo značenju definirane komponente, preuzeto iz izraza na CO. t. Kontrolne analize ispitivane serije i analize će se provoditi u skladu s odobrenom znanstveno-tehničkom dokumentacijom. 2.4.4 Maseni sadržaj dušika u suhoj tvari (br.) kao postotak izračunava se pomoću formule

I ovo A, = --. en gle L masena koncentracija dušika u ispitivanom uzorku. te maseni udio vlage u ispitnom uzorku. Se.

2.5 Maseni sadržaj sirovih bjelančevina u ispitnom uzorku (\,) ili u suhoj tvari (X;) kao postotak izračunava se pomoću formule

AX) = 6,23M A.

gdje je 6,2% faktor pretvorbe za ukupni sadržaj dušika u sirovim proteinima: A je maseni sadržaj dušika u ispitnom uzorku. “; X. maseni udio azuta u suhoj tvari. “e.

3 Fotometrijska indofenolna metoda za određivanje dušika

Bit metode leži u razgradnji organske tvari uzorka s konjugiranom sumpornom kiselinom uz stvaranje amonijevih soli i naknadno fotometrijsko određivanje prisutnosti obojenog inlofenolnog spoja. nastaje u sumporu svile kada se kombinira sa salijevim ilatom i natrijevim hipokloritom i ima maksimalnu apsorpciju svjetla od 655 nm. Koncentracija koncentracije u fotometriranim otopinama treba biti 0,01 9.

4. Oprema. materijala i reagensa

Laboratorijske vage 2. razreda točnosti u skladu s GOST 24104 s najvećim rasponom vaganja od 20% ili slične po točnosti laboratorijskim vagama 4. razreda točnosti u skladu s GOST 241494 s vrlo visokim rasponom vaganja od 5 tona ili drugim vagama od iste klase točnosti.

Mlinac za uzorkovanje biljaka IPR-2.

Rezač slame marke ISR-[ ili drugih marki.

Sušilica za uzorke hrane marke SK-G ili laboratorijski ormar za sušenje s pogreškom u održavanju temperature ne više od SC.

Meliina laboratorijske kvalitete MRI-2 ili drugih marki.

Sito s rupama promjer | mm.

Fotoelektrični kolorimetar. ima svjetlosni filter s maksimalnim prijenosom svjetlosti u području od 620 670 im.

Električni grijač s temperaturom zagrijavanja od 350) 400 ‘C ili plinski plamenici.

Gumena žarulja.

Epruvete od stakla otpornog na toplinu zapremine 50-100 cm’ ili tikvice od stakla otpornog na toplinu zapremine 100 cm*.

Da li torus s kapacitetom od 3 cm? ili pipeta za granuliranje kapaciteta Zem’! prema GOST 29169.

GOST 13496.4-93

Klipna pipeta ili čizma kapaciteta 2 cm' prema GOST 29169.

Shiri-lozator ili granulirane pipete kapaciteta 0,5 i 2,5 µm prema GOST 29109.

Domtor kapaciteta 50 cm' ili mjerni stup kapaciteta 50 cm prema GOST 177).

Kjellalove tikvice kapaciteta NU i 500 cm*.

Odmjerne tikvice zapremnine od 100 do 1000 cm' prema GOST 1770.

Kemijske čaše ili konusne tikvice kapaciteta 1 cm prema GOST 25346.

Birete i granulirane čizme kapaciteta do 50 cm’ prema GOST 1770.

Amonijev klorid prema GOST 3773, analitički stupanj.

Natrijev hidroksid prema GOST 43238. Otopina analitičkog stupnja s (\aOH) = 2

Natrijeva salicilna kiselina, žličica. A.

Natrijev nitroprusid. h.d.i.

Kalijev natrijev tartarat prema GOST 5845. analitički stupanj.

Dinatrijeva sol otilendiamin-br. Ne. Ne. U-tetraoctena kiselina. 2-volia (grilon B) prema GOST 10652. x. 4.

Kitestota broj POCT 4204. a. a. a.

Tehničko klorno vapno.

Volorol peroksid prema GOST 1929. otopina, masena koncentracija 30 x. CH.

Natrijev karbonat bez valova prema GOST 83. analitički stupanj.

Klorovodična kiselina prema GOST 311$, analitički stupanj.

Kalijev list prema GOST 4232. analitički stupanj.

Natrijev sulfat (tnosulfat), standardni titar.

Boga navedeno prema GOST 6249.

4.2 Priprema za ispitivanje prema 2.2.1.

3.2.1 Irigotomaenie rješenja

3.2.1.1 Priprema otopine 1

57 g natrijeve salinilne kiseline. 17 g natrijevog tartarata i 27 g natrijevog hidroksida otopi se u 700 cm3 destilirane vode da se uklone tragovi amonijaka. Nakon hlađenja doda se 0,4 g natrijevog pitroprusila volumen od 1 lm se napuni destiliranom vodom. U dobro zatvorenoj boci reagens se može čuvati u hladnjaku oko [|

3.2.1.2 Priprema otopine 2

To 5) cm' otopina | dodati 40% cm2 vode i 19 ml otopine natrijevog hidroksida sa = 2 mol/lm dodati [g Trilona B. Otopina se priprema bez analize.

3.2.1.3 Priprema otopine 3

150 g izbjeljivača pomiješa se u čaši zapremine 500 cm25) cm’ destilirane vode. U drugoj čaši otopi se 105 g natrijeva karbonata u 250 cm’ destilirane vode. Obje otopine se ocijede uz stalno miješanje. Masa se prvo zgusne. zatim se ukapljuje. Ovjes je ostavljen na | 2 dana taloženja, prozirna vena je ocijeđena i ocijeđena kroz papirnati filter.

U otopini 3 određuje se koncentracija aktivnog klora. Za prozirni filtrat, otopina 3 se razrijedi u konusnoj tikvici zapremine 1) cm s destiliranom vodom od 40 cm. dodati 2 g polikalija i 19 jesti` | mol/dm' otopine klorovodične kiseline. Dobiveni jod titrira se otopinom natrijeva tiosulfata s O, EN.O) = 0,1 mol/lm*. pripremljeno iz standardnog titra nestaje boja trešnje.

Veza aktivnog klora (c). g/dm`. izračunati po formuli

c = 0,00355. RYO. 1000.

rae G volumen otopine natrijeva tiosulfata c = 0,1 mol/dm.” koristi se za titraciju G cm* otopine 3. Tj. (1,00355 mase klora. Odgovara [cm* otopine natrijeva tiosulfata s (Ma;$.0, SHO) = = 0,1 g: 1000 faktor pretvorbe. Otopina 3 se čuva u tamnoj staklenoj boci u hladnjaku lo[gola.

GOST 13496.4-93

3.2.14 Priprema otopine 4

Otopina 3 se razrijedi listiliranim volovima pri koncentraciji aktivnog klora od 1,2 t/lm' i koristi se za analizu tijekom razdoblja.

Volumen otopine 3. potreban za pripremu određenog volumena otopine 4. izračunava se pomoću formule

cae 1.2 potrebna koncentracija klora. G volumen otopine 3. potreban za pripremu G; cm' otopina 4. cm: r. volumen pripremljene otopine 4. cm”:

“koncentracija aktivnog klora. 3.21.5 Priprema otopine sumporne kiseline. koji sadrži selen. prema 2.2.2.2. 3.2.1.6. Priprema bazične otopine amonijeva klorida

Uzorak od 1,919 g amonijevog klorida (sadrži 99,5 glavne tvari) otopi se u vodi i volumen otopine se napuni protočenom vodom KAZH cm. Otopina sadrži 0,5 mg dušika u | cm.

3.2.17) Priprema usporednih rješenja i izrada e-pa-grafova

Uzeti osam numeriranih odmjernih tikvica obujma 1/2 cm' i točiti iz birete obujma 50 cm' naznačene u tablici | količine otopine za podlijevanje. Zatim u svaku tikvicu dodajte oko polovicu volumena listilirane tekućine i dodajte 3 cm koncentrirane sumporne kiseline. solerzhishey selen. pripremljeno prema 2.2.2.2, i pomiješati. Nakon hlađenja dodajte volumen otopine do oznake s destiliranom vodom i ponovno promiješajte.

Prekretnica je početak svakog testa za konstrukciju | kalibracijski grafikon iz svake tikvice otopina Broj kućanstva Bazičnost volumena Sadržaj vapna i IM cm "usporedbe uzeti neo (). 5 jesti: otopina. brojati PACT Hap usporedba. m otopina i staviti u numerirane osam čaša s kapacitetom br. cm " zatim ulijte u svaku čašu 50 cm otopine 2. Pomiješajte i dodajte 2,5 šalice otopine 4. Ponovno promiješajte i ostavite otopine da odstoje na sobnoj temperaturi dok se potpuno ne razvije boja.

Optička gustoća otopina mjeri se u odnosu na prvu referentnu otopinu koja ne sadrži azog. u kivetama s prozirnim slojem debljine 10 mm. pomoću crvenog filtra s maksimalnim prijenosom od 620 67) im.

Na temelju rezultata fotografiranja referentnih otopina izrađuje se kalibracijski grafikon. iscrtavanje sadržaja dušika u miligramima na 100 cm” usporednih otopina na abepis osi. a na osi ordinata su indikatori optičke gustoće otopina.

33 Izvođenje testa

3.3.1 Priprema mineralizata

U suhoj epruveti. slobodno ulijte u grlo tikvice otporne na toplinu ili u cijev za izgaranje, odvažite 0,2-0,3 g ispitnog uzorka hrane. Epruvetu s uzorkom umetnuti u OV zbirke ili u epruvetu za spaljivanje lana. izlijte uzorak i ponovno izvažite epruvetu. Masa uzorka određena je razlikom između prvog i konačnog vaganja. uzeti na analizu. Uzorku dodajte 2 volumena 30% otopine volorol peroksida. Nakon 1,5 2 minute dodajte 3 cm* konjugirane sumporne kiseline. sadrže selen i lagano protresite. Epruvete ili broj

GOST 13496.4-93

postupno bi se zagrijavao do 340–330 °C. Mineralizacija uzoraka se nastavlja sve dok otopina potpuno ne desaturira. Ako nakon 1.A 2 nema promjene boje. otopina se ohladi na 60°C. plima | Jedem volorol peroksid i kuham dok potpuno ne dehidriram.

Nakon odmuljivanja, otopina se hladi. Kvantitativno prenijeti u odmjernu tikvicu i razrijediti destiliranom vodom na 10 cm? i promiješajte. Dopušteno je ispitivanje minerala u kalibriranim epruvetama.

3.3.2 Fitometrijsko određivanje dušika u mineralizatima

Za određivanje grožđica uzima se 0,5 cm mineralizata u konusnu tikvicu ili čašu zapremine 1/2 cm pomoću pipete ili dozatora. pripremljen prema 3.3.1. dodajte mu 50 jedinica otopine 2 i promiješajte. zatim dodajte 2,5 cm* otopine 4 pomoću pipete ili dozatora Ponovno promiješajte i ostavite otopinu na | h na sobnoj temperaturi za potpuno razvijanje boje.

Optička gustoća otopina mjeri se u odnosu na referentnu otopinu koja sadrži dušik. u kivetama s prozirnim slojem debljine 10 mm. pomoću crvenog filtra s maksimalnim prijenosom od 620 670 im.

Ako očitanje instrumenta za ispitnu otopinu prelazi očitanje osme referentne otopine. zatim početna otopina mineralizata. pripremljen prema 3.3.1. razrijedi s prvom referentnom otopinom do optimalne koncentracije za fumemetriju (optička gustoća 0,2 -0,5).

Istodobno će se provesti kontrolni pokus radi provjere kontaminacije vode i reagensa amonijakom. isključujući uzimanje dijela hrane.

3.4 Obrada rezultata

4.4.1 Maseni sadržaj azota (L) u postocima u ispitnom uzorku izračunava se pomoću formule

Y= (en - amy) UO

Ako je početna otopina mineralizata razrijeđena analizom, dobiveni rezultat se povećava onoliko puta koliko je puta bila razrijeđena originalna otopina.

Konačni rezultat ispitivanja uzima se kao aritmetički prosjek rezultata dva paralelna određivanja. Rezultati se računaju na treću decimalu i zaokružuju na drugu decimalu.

3.4.2 Dopuštena odstupanja između rezultata dva paralelna određivanja (i između dva rezultata dobivena pod različitim uvjetima (0) (u različitim laboratorijima, u različito vrijeme, pri radu na različitim uređajima itd.) s vjerojatnošću pouzdanosti od P = 0,95 ne smije prelaziti sljedeće vrijednosti:

d = 0,03+0,03%, D = 0,08+0,077.

fae rezultati lv\x paralelna definicija. T.

Xx X je nearitmetički rezultat dva testa. izvodi pod različitim uvjetima. “®. Granična pogreška rezultata analize (^,) s jednostranom vjerojatnošću pouzdanosti

nost P = 0,95 izračunava se pomoću formule A. = 0,046 + 0,039%.

Dopušteno je provoditi analizu bez paralelnih određivanja ako u seriji uzoraka koji se ispituju postoje standardni uzorci (RM). U tom slučaju (uz obaveznu selektivnu statističku kontrolu paralelne rascjepljivosti) rezultat testa se uzima kao rezultat. 1b-

GOST 13496.4-93

tat jedne definicije. ako razlika između masenog sadržaja dušika (2) reproduciranog i certificiranog u SB ne prelazi

Odjeljak A: potvrđena vrijednost komponente koja se utvrđuje. preuzeto iz potvrde za CO. 3.4.3 Miassov sadržaj azota u suhoj tvari izračunava se prema 2.4.4.

3.5 Maseni sadržaj sirovih bjelančevina u ispitnom uzorku ili u suhoj tvari izračunava se prema 2.5.

PRIMJENA

Određivanje sadržaja dušika i proračun sadržaja sirovih bjelančevina (NSO 5983-79)*

Standard za uporabu u operacijama uvoza i izvoza za kontrolu kvalitete hrane za životinje prema sadržaju

sadrže zip i sirove bjelančevine 1 Definicija

Najnoviji međunarodni standard utvrđuje metodu za određivanje sadržaja ana u stočnoj hrani i za izračunavanje sadržaja sirovih bjelančevina.

2 Opseg primjene Meta ne pravi razliku između proteinskih i neproteinskih proteina. Ako je potrebno odrediti sadržaj neproteina, moraju se koristiti odgovarajuće metode. U nekima ova metoda ne otkriva u potpunosti azog nitraton i

Poljoprivredno-prehrambeni proizvodi Opće smjernice za određivanje Anna metodom Kjeld

4 Principi Razgradnja organske tvari sumpornom kiselinom u prisutnosti katalizatora. oslobađanje produkta reakcije shelonom. listilacija i titracija visokohlapljivog amonijaka. Izračunajte sadržaj dušika i pomnožite rezultat s faktorom 6,25 kako biste dobili sadržaj sirovih proteina

$ Rezkgyvy

Pčelinji reagensi moraju biti odobreni i čisti za analizu. Voda koja se koristi mora biti čista 1- izlužena voda iste čistoće.

Boe reagensi. s izuzetkom standardnih uzoraka (5.6). loazhny praktički besplatni orga- THC TES COC LHC HHS,

51 Kalijev sulfat

52 katalizator.

Zlostavljanje. Pozornost će se usmjeriti na toksičnost ruti slanaca. Potrebno ga je promatrati

mjere opreza koji sadrže živu. ne možete ga izliti u arenu

mu. ali treba biti alias za kasniju obradu. 5.2.1 P živa ili 3.2.2) Osnteb piv (IE 3. ili 5.2.3 Taljeni oksid (PU chO), ili 3.2.4 Sumporov dioksid mel (I) pntivoanan C 650; &3 Sumporna kiselina 1.44

U Ruskoj Federaciji, vidi GOSTR 51417 39.

GOST 13496.4-93

5.4 Parafinska smola.

I Saharov.

56 Standardne slike

36.1 Anstanilil. mjesto isporuke 113 sadržaj ata SMR 10,37 9 sii.

56.2 Triitofan. kolica za blanjanje 252 C. sadržaj dušika GU TA. 47 san

5 Rastnor natrijev tiaroksid, 35 4

A Ne. Reaktin za taloženje

Otopina natrijevog tiosulfata pripremljena otapanjem AO g tiosulfid pentavitana

broj 1150; 1010 cm vode. ići

5%.2 Hypaphiufit natrij ili kalij.

9$ Apsorbira 4 kosti

59.1 Sumporna kiselina s 3) = 0,15 i 0,125 standardne otopine tigronana ili 534.2 Otopina borne kiseline, 40 glm®.7 Uzorci

Slike se čuvaju u uvjetima koji dopuštaju brokat i promjene kompozicije.

8 Izvođenje testa

Hh! Uzimanje zastoja

Izvažite nansec uzorke s preciznošću | ms. koji sadrži 9.005 6.05 novina. Važno je da težina uzorka bude između I.Z i 2,0 haprelalmost asal 1,01)

Zabilježite je. Zbog neoanogenosti uzorka, vrijednost uzorka je veća od gore navedene. pa bi stoga očekivani sadržaj dušika trebao biti veći od 09,0 g. Sukladno tome, povećava se volumen sumporne kiseline u prijemnom toku (točka X.2.2). ako se dnevni boravak koristi kao udomiteljski smještaj

Predrasuda! Operacije nakon lučenja provode se pod dobro prozračenom tavom u ormaru

x.2.1 Postavljanje organskih

Cijeli uzorak se kvantitativno prebaci u posudu odgovarajućeg kapaciteta (obično 00 $ hmm) doda se kalijev sulfat 15 |. Ako je katalizator ili Peli oksid 1. 10 tona Kogas sulfata dovoljan, katalizator je bakar oksid (Irili pentacarriage sulfat mesi HE. prebustea 15 g kalija

Dodajem odgovarajuću količinu katalizatora: za sve proizvode može se koristiti 9.65 E CE kanal žive (9.2. Roštilji 0.7 gokisi ruli (11 $5. #111 (5.2.4 nai 0.9-- 1.2 r pyagivolnogo sulifate meli (Iru)

2;. Umjesto toga, možete koristiti N.A.

2.4). instalirano. CTO s ovom ala punom ekspozicijom zahtijeva duže izgaranje.

Bilješka. Kada se analizira hrana s visokim udjelom anna. koristiti živu kao katalizator.

25 cm sumporne kiseline (AZ od prvog grama suhe tvari i 6-G za svaki gram suhe tvari škroba i masti potrebno je oko 12 grama kiselosti, redom). Temeljito promiješajte da se nanseka potpuno navlaži. Cola se najprije umjereno zagrijava kako bi se spriječilo da pjena ispuni grlo tikvice ili da iz tikvice izbaci.

Češljanje. Bitno je pogoditi ono protiv pjenjenja, kako. Na primjer. parafin smo. 415.4).

GOST 13496.4-93

Zagrijte umjereno. okrećući sat s vremena na vrijeme dok vrijeme nije jasno

pjena. Zatim grijanje dok se ne uspostavi ravnomjerno savijanje Grijanje ue

oštrenje ako se kininska kiselina kondenzira u sredini torusa Klassijeve tikvice. Treba izbjegavati pregrijane zidove koji nisu u kontaktu. Takvo se pregrijavanje može izbjeći stavljanjem tikvice na lim aebesta s nešto manjim otvorom. od 1 od četvrtine tikvice na razini

Tijekom zagrijavanja, tikvicu treba nagnuti prema podu pod kutom od 3-4 u odnosu na površinu.

Nakon što su se vene očistile, zagrijavanje se nastavlja za Gy u slučaju korištenja živinog katalizatora ili 24 u slučaju korištenja finog katalizatora.

Ostavite kolače da se ohlade. Ako hladnoća mineralizat očvrsne. Preporuča se KORISTITI volumen kiseline od gore navedenog za SPALJIVANJE vulkanske kiseline.

X.2.2 Oteovlo amonijaka

Pažljivo dodajte 251 - 350 cm dok se potpuno ne otopi, miješajte kružnim pokretima i ostavite da se ohladi. Dodajte noćnu tvar. prelotvrashakineto ejection 15.13) Koristeći pintu, prenesite 25 cm' otopine sumporne kiseline s = = 0,9 ili 0,125 "15.9. 1) Koncentracija kiseline odabire se ovisno o očekivanom sadržaju dušika u premazu (napomena uz i. & 0). dodati IO 154 cm volova i nekoliko kapi miješanog indikatora 1.119.

Vrh hladnjaka se puni u venu. kontemplacija u prijamnim kotačima, ns manje | vidi. Polako dodajte otopinu natrijevog hidroksida 19.7 na stijenke Kjellalijeve tikvice.

Bilješka. Ako je sumporni kikaotly 45.3) od naznačenog (5.2.1. niya abzai!. saslus? proporcionalno povećanju volumena natrijeva tizroxyaa.

Kad bi se soli žive konzumirale kao kvalitetne. Otopina natrijevog hidroksija prije dodavanja klipu pomiješa se s 25 cm’ otopine tiosulfata 45.5. jedanaest

Frizerski rad. Ako to radite odvojeno. tposulfat može reagirati s oblaganjem sulyfryaa s volorylom. što dovodi do iskrivljavanja izvješća. Umjesto hiosulfita možete koristiti hilofoesfit 1.5.2). U svakom slučaju, nema opasnosti od stvaranja sulfil volorola. Gtinofosfit. Lafayalennogo u tnerom visa nisai ravenie ox do pritoka svile. Na kraju dana oborina E t žive.

Nemellenni kiba se usisava na opon aparat i zagrijava takvim intenzitetom da se u minuti skupi 150 jedinica listijalata. Nakon toga, pomoću papira (5 12) provjerite pH destilata na vrhu dozatora imOki. Ako je reakcija alkalna, nastavite

Nakon završetka liste, kraj cijevi hladnjaka uklanja se iz hladnjaka kako bi se spriječilo obrnuto brtvljenje. Ako je tijekom privremene stenoze kola stanovitis šelonit. definicija se ponavlja i prave se odgovarajuće izmjene. Prilikom ulijevanja ammizke u komoru za bor sipaju 25% ou! Gopatoit AME E8904 otopina,

X.2.3 Tetoviranje

Reni kao upijajucu venu koristio je sernan kisayuta. Višak se titrira otopinom natrijevog hidroksida uz (Xao Hm = i. nai 0,25 molgam 45. IEP) di prijelaza konačne boje u zelenu.

Ako je unan borna kiselina korištena kao upijajuće kućište. amonijak se titrira otopinom černoinske kiseline Ol = 1,05 ili 0,125 molgama I 15 ao boja otopine se mijenja od zelene do fi-

Odlučio sam provesti titraciju, ali ne zasad, budući da mi to omogućuje da razjasnim konzistenciju lis- Kraj listylnia će uzrokovati promjenu boje miješanog inlikatora 1 111.

Nemoguće je provesti titraciju u isto vrijeme kada i test. slelust titronat sumpor nakon okonchanin slelya iza toga. tako da temperatura listilata ne prijeđe 25 ©. U ekstremnim uvjetima troši se amonijak

xs Chicalo definicije

Provedite dvije kompletne dijete

X4 Otkrivanje praznog mjesta

Holaste opreasasnie prolednt. koristeći (5.5 kao ispitni uzorak

Xx Control anzaai o

Kangrolni je bio poznat; provolyat određivanjem sadržaja vina u acetanilizi |) nai tringofane dofavalaya [t saharoza C 5)

Odabir analizirane tvari za kontrolnu analizu ovisi o tome koliko im je lako provesti nestandardne uzorke. Acetanylia lako stvara modrice. Tada se KOK prije upotrebe mora osušiti.

1,03 4 - sa sadržajem dušika od menss 3 ati k E I u odnosu na prosječni rezultat pri održavanju ziogaa 6 H fi OA @ - sa spaerzhaniya zyut više od 6 biti sjene.

92 Izračun udjela sirovih bjelančevina Udio sirovih bjelančevina u proizvodu izračunava se množenjem udjela bjelančevina sa 6,2%.

Rezultati se izračunavaju s točnošću od 0,1 oko 10 Izvješće o ispitivanju

Izvješće o ispitivanju treba navesti korištenu metodu i dobivene rezultate. upute za prepričavanje Čet 6.25). koristi se za pretvaranje sadržaja brade u sirove bjelančevine. \eloviya punjenje enadizi. nije navedeno u ovoj međunarodnoj normi ili se smatra izbornim. kao i lyubys ibstontelstya. koji zaziru od rezultata.

GOST 13496.4-93

Grupa C19

MEĐUDRŽAVNI STANDARD

STOČNA HRANA, KRMNA SMJEŠA, SIROVINE KRMNE SMJEŠE

Metode određivanja sadržaja dušika i sirovih bjelančevina

Stočna hrana, krmne smjese i sirovine za stočnu hranu.
Metode određivanja dušika i sirovih bjelančevina

Datum uvođenja 1995-01-01

Predgovor

1 RAZVIO Gosstandart Rusije

UVODNO Tehničko tajništvo Međudržavnog vijeća za normizaciju, mjeriteljstvo i certificiranje

2 DONIJELO Međudržavno vijeće za normizaciju, mjeriteljstvo i certificiranje 21. listopada 1993.

Naziv države	Naziv nacionalnog tijela za normizaciju
Republika Kirgistan	Kirgistanski standard
Republika Moldavija	moldavski standard
Ruska Federacija	Gosstandart Rusije
Republika Tadžikistan	Tajikgosstandart
Turkmenistan	Glavni državni inspektorat Turkmenistana
	Državni standard Ukrajine

3 Dekretom Odbora Ruske Federacije za standardizaciju, mjeriteljstvo i certifikaciju od 02.06.94 N 160, međudržavni standard GOST 13496.4-93 stavljen je na snagu izravno kao državni standard Ruske Federacije od 01.01.95.

4 UMJESTO GOST 13496.4-84

5 PONOVNO IZDANJE

INFORMACIONI PODACI

REFERENTNI REGULATIVNI I TEHNIČKI DOKUMENTI

	Broj predmeta
GOST 5962-67
GOST 24104-88

Ova se norma odnosi na sve vrste stočne hrane, krmnih smjesa i sirovina za životinje (osim mineralnog podrijetla, stočnog kvasca i paprina) i utvrđuje titrimetrijske (Kjeldahl) i fotometrijske metode za određivanje dušika s naknadnom pretvorbom rezultata u sirove bjelančevine.

1 Uzorkovanje

2 Titrimetrijska metoda za određivanje dušika po Kjeldahlu
(glavna metoda)

Bit metode je razgradnja organske tvari uzorka kipućom koncentriranom sumpornom kiselinom uz stvaranje amonijevih soli, pretvorba amonijaka u amonijak, njegova destilacija u kiselu otopinu, kvantitativno izračunavanje amonijaka titrimetrijskom metodom. te proračun sadržaja dušika u ispitivanom materijalu.

2.1 Aparatura, materijali i reagensi

Laboratorijske vage 2. razreda točnosti prema GOST 24104* s najvećom granicom vaganja od 200 g.
________________
* Od 1. srpnja 2002. stupio je na snagu GOST 24104-2001 (u daljnjem tekstu).

Laboratorijske vage 4. razreda točnosti prema GOST 24104 s maksimalnom granicom vaganja od 500 g ili druge vage iste klase točnosti.

Električni grijači ili plinski plamenici.

Postrojenje ili aparat tipa Kjeldahl za destilaciju amonijaka vodenom parom (vidi slike 1. i 2.).

1 - tikvica s kapacitetom od 1000 cm3; 2 - lijevak za kapanje kapaciteta 100 cm; 3 - hvatač kapljica;
4 - hladnjak; 5 - prijemna tikvica kapaciteta 250 cm3; 6 - stol za podizanje;
7 - grijač plašta ili električni štednjak s regulatorom temperature,
ili plinski plamenik

Slika 1

1 - prijemna tikvica; 2 - hladnjak; 3 - hvatač kapljica; 4 - tikvica za destilaciju; 5, 9 - lijevci;
6, 7, 8 - slavine; 10 - generator pare

Slika 2

Kapaljka za indikator.

Instalacija za titraciju s biretom 2. klase točnosti kapaciteta 10, 25 ili 50 cm prema GOST 29252.

Porculanski tarionik i tučak prema GOST 9147.

Kjeldahlove tikvice zapremnine 100, 250 ili 500 cm3.

Stakleni lijevci promjera 2-3 cm prema GOST 25336 ili Kjeldahl čahure.

Konusna tikvica kapaciteta 250 cm prema GOST 25336.

Mjerne tikvice kapaciteta 500 i 1000 cm prema GOST 1770.

Mjerni cilindri kapaciteta 50 i 1000 cm prema GOST 1770.

Pipete s stupnjevanjem kapaciteta 1 i 25 cm prema GOST 29169.

Porculansko staklo kapaciteta 1000 cm prema GOST 9147.

Kemijsko staklo kapaciteta 50 cm prema GOST 25336.

Azbestne ploče.

Tvari koje sprječavaju izbacivanje tekućine: komadići porculana, staklene kuglice, svježe kalcinirani komadići plovućca.

Koncentrirana sumporna kiselina prema GOST 4204, x. h., h.d.a. i standardni titar otopine sumporne kiseline 0,05 mol/dm (0,1 N).

Bakar sulfat 5-voda prema GOST 4165, analitički stupanj, kemijski stupanj. h.

Bezvodni natrijev sulfat prema GOST 4166, analitički stupanj.

Selen, h.

Rektificirani etilni alkohol prema GOST 5962*.
________________
* U Ruskoj Federaciji na snazi ​​je GOST R 51652-2000.

metil crveno.

Metil plavo ili bromokrezol zeleno.

Bilješka. Dopuštena je uporaba opreme, mjernog posuđa i drugih mjerila koja imaju ista ili bolja mjeriteljska svojstva.

2.2 Priprema za ispit

2.2.1. Priprema uzoraka za ispitivanje

Prosječan uzorak sijena, silaže, sjenaže, slame, zelene krme i dr. zgnječen u komade duljine 1-3 cm; Korjenasti i gomoljasti usjevi režu se na ploške (ploške) debljine do 0,8 cm. Metodom četvrtina izdvaja se dio prosječnog uzorka čija masa nakon sušenja mora biti najmanje 50 g. Sušenje uzoraka u sušioniku na temperaturi od 60-65 °C do suhog stanja bez zraka.

Nakon sušenja, zrakom osušeni uzorak melje se u laboratorijskom mlinu i prosijava kroz sito. Ostatak koji se teško usitnjava na situ nakon ručnog usitnjavanja škarama ili u mužaru dodaje se prosijanom dijelu i dobro se miješa.

Prosječni uzorak krmne smjese i sirovina za životinje melje se i prosijava bez prethodnog sušenja.

Uzorci pripremljeni za ispitivanje čuvaju se u staklenoj ili plastičnoj posudi s brušenim čepom (poklopcem) na suhom mjestu.

Uzorci tekuće hrane analiziraju se bez prethodne pripreme.

2.2.2 Priprema reagensa i otopina

2.2.2.1 Priprema miješanih katalizatora

Katalizator 1. Pomiješajte 10 težinskih dijelova bakrenog sulfata, 100 težinskih dijelova kalijevog sulfata i 2 težinska dijela selena, temeljito usitnite u mužaru kako biste dobili fino zrnati prah.

Katalizator 2. Pomiješajte 10 težinskih dijelova bakrenog sulfata i 100 težinskih dijelova kalijevog sulfata, temeljito usitnite u mužaru kako biste dobili fino zrnati prah.

Pri pripremi katalizatora 1 i 2 dopušteno je zamijeniti kalijev sulfat s kalijevim persulfatom ili natrijevim sulfatom u istoj količini.

2.2.2.2. Priprema otopine sumporne kiseline koja sadrži selen

Amorfni ili mljeveni selen, u količini od 5 g na 1 dm kiseline, otapa se zagrijavanjem u koncentriranoj sumpornoj kiselini u tikvici postojanoj na toplinu do promjene boje.

2.2.2.3 Priprema otopine sumporne kiseline (1/2 HSO) = 0,05 mol/dm (0,1 n)

Koristi se standardni titar sumporne kiseline. Otopine se pripremaju u skladu s pravilima koja su priložena kompletu.

Dopušteno je pripremiti otopinu sumporne kiseline (1/2 HSO) = 0,05 mol/dm iz koncentrirane sumporne kiseline u skladu sa zahtjevima GOST 25794.1.

2.2.2.4 Priprema otopine borne kiseline s masenom koncentracijom od 4%

40 g borne kiseline se uz zagrijavanje otopi u maloj količini tople vode i prenese u tikvicu zapremine 1000 cm3, nakon hlađenja se dopuni vodom do 1000 cm3.

2.2.2.5 Priprema mješovitog indikatora

Prilikom titriranja koristite jedan od sljedećih indikatora:

Indikator 1 - otopiti 0,20 g metil crvenog i 0,10 g metilenskog modrila u 100 cm3 96% otopine etilnog alkohola;

Indikator 2 - pomiješati 3 volumena 0,1% otopine bromokrezolnog zelenog u etilnom alkoholu i 1 volumen 0,2% otopine metilnog crvenog u etilnom alkoholu. Indikatore čuvati u tamnoj boci.

2.2.2.6 Priprema otopine natrijevog hidroksida s masenim udjelom od 33%

330 g natrijevog hidroksida otopi se u porculanskoj čaši u 670 ml destilirane vode.

2.2.2.7 Priprema otopine natrijevog hidroksida s masenim udjelom od 40%

400 g natrijevog hidroksida otopi se u porculanskoj čaši u 600 ml destilirane vode.

2.3 Izvedba testa

2.3.1 Priprema mineralizata

U dugačku suhu epruvetu koja slobodno pristaje u grlo Kjeldahlove tikvice izvažite 0,7-1 g biljne hrane, krmne smjese, 0,3-0,5 g životinjskog brašna ili 0,4-0,5 g kvasca s greškom ne većom od 0,001 g. Umetnuvši epruvetu u Kjeldahlovu tikvicu do njezina dna, izlijte uzorak i ponovno izvažite epruvetu. Razlika između prvog i drugog vaganja koristi se za određivanje mase uzorka uzetog za analizu. Mineralizacija se provodi na jedan od dva načina:

Metoda 1. Dodajte 2 g miješanog katalizatora 1 ili 8 g katalizatora 2 u Kjeldahlovu tikvicu, pažljivo ulijte 10-12 cm koncentrirane sumporne kiseline, ovisno o težini uzorka;

Metoda 2. U Kjeldahlovu tikvicu dodajte 10 cm3 vodene otopine vodikovog peroksida s masenim udjelom 30% kao oksidacijsko sredstvo. Nakon prestanka burne reakcije dodajte istu količinu koncentrirane sumporne kiseline. Za ubrzanje izgaranja preporuča se koristiti sumpornu kiselinu koja sadrži selen, pripremljenu prema točki 2.2.2.2.

Sadržaj Kjeldahlove tikvice temeljito se izmiješa laganim kružnim pokretima, čime se osigurava potpuno vlaženje uzorka. Tikvica se postavi na grijač tako da joj je os nagnuta pod kutom od 30-45° u odnosu na okomicu; u grlo tikvice umetne se mali stakleni lijevak ili čahura kako bi se smanjilo isparavanje kiseline tijekom mineralizacije. Najprije se tikvica umjereno zagrijava kako bi se spriječilo snažno pjenjenje.

Prilikom zagrijavanja uzorak se povremeno promiješa okretanjem tikvice. Nakon nestanka pjene, zagrijavanje se pojačava dok tekućina ne zavrije. Zagrijavanje se smatra normalnim ako se kiselinska para kondenzira bliže sredini grla Kjeldahlove tikvice, izbjegavajući pregrijavanje stijenki tikvice koje nisu u dodiru s tekućinom. Ako se koristi otvoreni plamen, takvo se pregrijavanje može spriječiti stavljanjem tikvice na azbestnu ploču s rupom nešto manjeg promjera od promjera tikvice na razini tekućine.

Nakon što tekućina promijeni boju (dopuštena je blago zelenkasta nijansa), grijanje se nastavlja 30 minuta. Nakon hlađenja mineralizat se kvantitativno prenese u tikvicu za destilaciju, Kjeldahl tikvicu ispere tri puta s 20-30 cm destilirane vode. Ukupni volumen otopine u tikvici za destilaciju treba biti 200-250 cm3.

Moguće je destilirati izravno iz Kjeldahlove tikvice. U ovom slučaju za mineralizaciju se koristi Kjeldahlova tikvica zapremine 500 cm3. Prije destilacije amonijaka mineralizat se razrijedi sa 150-200 cm3 destilirane vode.

Prilikom provođenja ekspresne analize u tvornicama stočne hrane i tijekom pripreme travnate hrane dopuštena je sljedeća metoda pripreme mineralizata.

Odvagani dio ispitnog uzorka mase 0,2-0,3 g stavi se u Kjeldahlovu tikvicu ili u epruvetu ili u staklenu tikvicu postojanu na toplinu. U tikvicu s uzorkom dodajte 4 cm vodene otopine vodikovog peroksida masene koncentracije 30%, au epruvetu - 3 cm. Nakon 1,5-2 minute u tikvicu se doda 5-8 cm, au epruvetu 2 cm koncentrirane sumporne kiseline koja sadrži selen, pripremljene prema 2.2.2.2. Sadržaj tikvice ili epruvete temeljito se promiješa kako bi se uzorak potpuno smočio. Tikvica ili epruveta s uzorkom stavlja se na električni grijač i zagrijava do vrenja. Zatim se zagrijavanje pojača i mineralizacija se nastavlja dok otopina potpuno ne promijeni boju (20-30 minuta). Ako otopina nije bistra, nastavite zagrijavati još 5-8 minuta ili ohladite, dodajte 0,5 cm otopine vodikovog peroksida masene koncentracije 30% i kuhajte dok potpuno ne promijeni boju. Mineralizat se nakon hlađenja kvantitativno prenese u odmjernu tikvicu od 100 cm3, destiliranom vodom dotjera volumen otopine do oznake i promiješa. 50 cm otopine mineralizata prenese se u tikvicu za destilaciju.

2.3.2 Destilacija i titracija amonijaka

2.3.2.1 Destilacija amonijaka u bornu kiselinu

U prihvatnu tikvicu ulije se 20 cm3 otopine borne kiseline masene koncentracije 4% i 5 kapi bilo kojeg od pomiješanih indikatora. Tikvica se stavi ispod hladnjaka tako da se njen vrh uroni u otopinu borne kiseline do dubine od najmanje 1 cm Hladna voda se propušta kroz hladnjak.

Destilacijsku tikvicu spojimo s aparatom za destilaciju amonijaka i u tikvicu s mineralizatom pažljivo kroz kapajni lijevak ulijemo otopinu natrijevog hidroksida masenog udjela 33%. Lijevak se ispere 2-3 puta s 10-15 cm destilirane vode, ostavljajući malu količinu vode kao vodenu brtvu. Dopušteno je dodati otopinu natrijevog hidroksida prije spajanja destilacijske tikvice na aparaturu. U tom slučaju, otopina natrijevog hidroksida se ulije u tikvicu za odvajanje uzduž stijenke, pazeći da se ne pomiješa s mineralizatom, i odmah spoji na aparat za destilaciju amonijaka.

Volumen dodanog natrijevog hidroksida ovisi o volumenu sumporne kiseline korištene za pripremu mineralizata. Na svaki kubni centimetar sumporne kiseline koji preostane nakon završetka procesa mineralizacije treba dodati najmanje 3,5 cm otopine natrijevog hidroksida s masenim udjelom od 33%. Ako je volumen preostale sumporne kiseline teško odrediti, volumen lužine izračunava se na temelju volumena sumporne kiseline uzete za mineralizaciju. Dopušteno je prethodno neutralizirati sadržaj destilacijske tikvice otopinom natrijevog hidroksida s masenim udjelom od 40%, koristeći bilo koji od indikatora. Da biste osigurali oslobađanje amonijaka, dodajte još 1 cm otopine natrijevog hidroksida s masenim udjelom od 40%.

Tikvica za destilaciju se zagrijava električnim grijačem ili plinskim plamenikom. Otopina u tikvici za destilaciju se zagrijava kako bi se osiguralo ravnomjerno vrenje. Dopušteno je provoditi destilaciju vodenom parom. Kako bi se spriječilo oslobađanje amonijaka, voda u generatoru pare mora se zakiseliti sumpornom kiselinom dok ne postane ljubičasta kada se koristi indikator 1 i ružičasta kada se koristi indikator 2.

Na početku destilacije amonijaka boja otopine u prihvatnoj tikvici postaje zelena. Pri normalnom vrenju volumen otopine u prihvatnoj tikvici nakon 20-30 minuta obično iznosi 150-200 cm3. Kod ekspresne analize vrijeme destilacije se smanjuje na 7-10 minuta. Završetak destilacije može se odrediti pomoću crvenog lakmus papira. Da biste to učinili, izvadite prijemnu tikvicu iz aparata, prethodno ispravši kraj hladnjaka destiliranom vodom, i stavite lakmus papir ispod tekućih kapljica destilata. Ako lakmus ne postane plav, destilacija amonijaka je završena. Ako lakmus postane plav, prihvatnu tikvicu ponovno staviti ispod hladnjaka i nastaviti destilaciju. Nakon završene destilacije prihvatna tikvica se spusti i kraj hladila se ispere destiliranom vodom u prihvatnu tikvicu. Titrirati amonijak iz birete otopinom sumporne kiseline (1/2 HSO) = 0,05 mol/dm dok se boja indikatora ne promijeni iz zelene u ljubičastu kod indikatora 1 i iz zelene u ružičastu kod indikatora 2.

2.3.2.2 Destilacija amonijaka u sumpornu kiselinu

U prihvatnu tikvicu pipetom se ulije 50 cm otopine sumporne kiseline (1/2 HSO) = 0,05 mol/dm. Destilacija se provodi na način naveden u stavku 2.3.2.1. Nakon završene destilacije sadržaj prihvatne tikvice (višak otopine sumporne kiseline (1/2 HSO) = 0,05 mol/dm) titrira se otopinom natrijevog hidroksida (NaOH) = 0,1 mol/dm do zelene boje.

2.3.2.3 Istovremeno s ispitivanjem provodi se kontrolni pokus na kontaminaciju vode i reagensa amonijakom, isključujući uzimanje uzorka hrane za životinje.

Volumen utrošene sumporne kiseline u kontrolnom pokusu pri destilaciji u bornu kiselinu ne smije biti veći od 0,5 cm3. Pri destilaciji u sumpornu kiselinu volumen otopine natrijevog hidroksida mora biti najmanje 49,5 cm3 standardi identificiraju izvore kontaminacije reagensa amonijakom i uklanjaju ih.

2.4 Obrada rezultata

2.4.1 Maseni udio dušika () u ispitnom uzorku kao postotak pri destilaciji amonijaka u bornu kiselinu izračunava se pomoću formule

,

gdje je volumen otopine sumporne kiseline utrošen za titraciju ispitne otopine, cm;

Volumen otopine sumporne kiseline utrošen za titraciju u kontrolnom pokusu, cm;

Korekcija titra otopine sumporne kiseline (1/2 HSO) = 0,05 mol/dm, ako nije pripremljena iz standardnog titra;

Težina uzorka, g;

2.4.2 Maseni udio dušika () u ispitnom uzorku kao postotak pri destilaciji amonijaka u sumpornu kiselinu izračunava se pomoću formule

,

gdje je volumen otopine natrijevog hidroksida (NaOH) = 0,1 mol/dm, utrošen na titraciju otopine sumporne kiseline (1/2 HSO) = 0,05 mol/dm u kontrolnom pokusu, cm;

Volumen otopine natrijevog hidroksida (NaOH) = 0,1 mol/dm3, utrošen za titraciju sumporne kiseline u ispitivanoj otopini, cm;

Korekcija titra otopine natrijevog hidroksida (NaOH) = 0,1 mol/dm;

0,0014 - masa dušika ekvivalentna masi sumporne kiseline sadržane u 1 cm otopine (1/2 HSO) = 0,05 mol/dm;

Težina uzorka, g;

100 je faktor pretvorbe u postotke.

Bilješka. Prilikom provođenja ekspresne analize, dobiveni rezultat se udvostručuje, jer se samo polovica volumena mineralizata koristi za destilaciju.

2.4.3 Dopuštena odstupanja između rezultata dva paralelna određivanja () i između dva rezultata dobivena u različitim uvjetima () (u različitim laboratorijima, u različito vrijeme, pri radu na različitim instrumentima itd.), s razinom pouzdanosti = 0, 95 ne smije prelaziti sljedeće vrijednosti:

,

,

gdje je aritmetička sredina rezultata dva paralelna određivanja, %;

Aritmetički prosjek rezultata dvaju testova izvedenih u različitim uvjetima, %.

Dopuštena odstupanja između rezultata paralelnih određivanja i ispitivanja provedenih pod različitim uvjetima mogu imati različit izraz, naveden u regulatornoj i tehničkoj dokumentaciji za ovu vrstu proizvoda.

Maksimalna pogreška rezultata analize () s jednostranom vjerojatnošću pouzdanosti = 0,95 izračunava se pomoću formule

.

Maksimalna pogreška rezultata analize koristi se pri ocjeni kvalitete hrane za životinje.

Dopušteno je provoditi analizu bez paralelnih određivanja ako u seriji uzoraka koji se proučavaju postoje standardni uzorci (RM). U tom slučaju (uz obveznu selektivnu statističku kontrolu konvergencije paralelnih određivanja), kao rezultat ispitivanja uzima se rezultat jednog određivanja ako razlika masenog udjela dušika (reproduciranog i certificiranog u referentnom standardu) ne prelazi

,

gdje je atestirana vrijednost komponente koja se utvrđuje, preuzeta iz certifikata za RM, %.

Kontrolne analize uzoraka pokusne serije i analize RM provode se u skladu s odobrenom znanstveno-tehničkom dokumentacijom.

2.4.4 Maseni udio dušika u suhoj tvari () u postocima izračunava se pomoću formule

gdje je maseni udio dušika u ispitivanom uzorku, %;

Maseni udio vlage u ispitivanom uzorku, %.

2.5 Maseni udio sirovih bjelančevina u ispitnom uzorku () ili u suhoj tvari () kao postotak izračunava se pomoću formule

,

gdje je 6,25 faktor pretvorbe ukupnog sadržaja dušika u sirove bjelančevine;

Maseni udio dušika u ispitivanom uzorku, %;

Maseni udio dušika u suhoj tvari, %.

3 Fotometrijska indofenolna metoda za određivanje dušika

Bit metode je razgradnja organske tvari uzorka koncentriranom sumpornom kiselinom uz stvaranje amonijevih soli i naknadno fotometrijsko određivanje dušika u obliku obojenog indofenolnog spoja, koji nastaje u alkalnom okruženju u interakciji sa salicilatom. i natrijev hipoklorit i ima maksimum apsorpcije svjetla na 655 nm. Koncentracija dušika u fotometriranim otopinama treba biti 0,01-0,14 mg/cm.

3.1 Aparatura, materijali i reagensi

Laboratorijske vage 2. razreda točnosti u skladu s GOST 24104 s maksimalnom granicom vaganja od 200 g ili slične po točnosti i laboratorijske vage 4. klase točnosti u skladu s GOST 24104 s maksimalnom granicom vaganja od 500 g ili druge vage iste klase točnosti.

Mlinac za uzorkovanje biljaka IPR-2.

Rezač slame marke ISR-1 ili drugih marki.

Sušilica za uzorke hrane marke SK-1 ili laboratorijski ormar za sušenje s pogreškom u održavanju temperature ne više od 5 °C.

Laboratorijski mlin marke MRP-2 ili drugih marki.

Sito s rupama promjera 1 mm.

Fotoelektrični kolorimetar sa svjetlosnim filtrom s maksimalnim prijenosom svjetlosti u području od 620-670 nm.

Električni grijač s temperaturom grijanja 350-400 °C ili plinski plamenici.

Gumena žarulja.

Epruvete od stakla otpornog na toplinu zapremine 50-100 cm ili tikvice od stakla otpornog na toplinu zapremine 100 cm.

Dozator kapaciteta 3 cm ili graduirana pipeta kapaciteta 3 cm prema GOST 29169.

Klipna pipeta ili pipeta kapaciteta 2 cm prema GOST 29169.

Šprica za doziranje ili graduirane pipete kapaciteta 0,5 i 2,5 cm prema GOST 29169.

Dozator kapaciteta 50 cm ili mjerni cilindar kapaciteta 50 cm prema GOST 1770.

Kjeldahlove tikvice zapremnine 100 i 500 cm3.

Mjerne tikvice kapaciteta od 100 do 1000 cm prema GOST 1770.

Kemijske čaše ili konusne tikvice kapaciteta 100 cm prema GOST 25336.

Birete i graduirane pipete kapaciteta do 50 cm prema GOST 1770.

Dinatrijeva sol etilendiamina-N", N", N", N" -tetraoctene kiseline, 2-voda (trilon B) prema GOST 10652, x. h.

Tehničko klorno vapno.

Selen, h.

Natrijev sulfat (tiosulfat), standardni titar.

3.2 Priprema za ispitivanje - prema 2.2.1.

3.2.1 Priprema otopina

3.2.1.1 Priprema otopine 1

57 g natrijeve salicilne kiseline, 17 g kalijevog natrijevog tartarata i 27 g natrijevog hidroksida otopi se u 700 cm3 destilirane vode. Otopina se kuha oko 20 minuta kako bi se uklonili tragovi amonijaka. Nakon hlađenja u dobivenu otopinu dodajte 0,4 g natrijevog nitroprusida i destiliranom vodom dovedite volumen na 1 dm. U dobro zatvorenoj boci reagens se može čuvati u hladnjaku do 1 mjeseca.

3.2.1.2 Priprema otopine 2

U 50 cm3 otopine 1 dodati 400 cm3 destilirane vode i 10 cm3 otopine natrijevog hidroksida (NaOH) = 2 mol/dm, zatim dodati 1g trilona B. Otopina se priprema na dan analize.

3.2.1.3 Priprema otopine 3

150 g izbjeljivača pomiješa se u čaši od 500 ml s 250 ml destilirane vode. U drugoj čaši otopi se 105 g natrijeva karbonata u 250 ml destilirane vode. Obje otopine se ocijede uz stalno miješanje. Masa se prvo zgusne, a zatim ukapi. Suspenzija se ostavi da se taloži 1-2 dana, zatim se bistra tekućina ocijedi i dekantira kroz papirnati filter.

U otopini 3 određuje se koncentracija aktivnog klora. Za to se 1 cm prozirnog filtrata otopine 3 razrijedi u konusnoj tikvici kapaciteta 100 cm destiliranom vodom do 40-50 cm3, doda se 2 g kalijevog jodida i 10 cm3 1 mol/dm otopine klorovodične kiseline. dodao. Dobiveni jod titrira se otopinom natrijevog tiosulfata (NaSO5HO) = 0,1 mol/dm, pripremljenom iz standardnog titra, do nestanka boje trešnje.

Koncentracija aktivnog klora (), g/dm, izračunava se pomoću formule

gdje je volumen otopine natrijevog tiosulfata (NaSO5HO) = 0,1 mol/dm, utrošen za titraciju 1 cm3 otopine 3, cm;

0,00355 - masa klora koja odgovara 1 cm otopine natrijevog tiosulfata (NaSO5HO) = 0,1 mol/dm, g;

1000 je faktor konverzije.

Otopina 3 čuva se u tamnoj staklenoj boci u hladnjaku do 1 godine.

3.2.1.4 Priprema otopine 4

Otopina 3 se razrijedi destiliranom vodom do koncentracije aktivnog klora od 1,2 g/dm i koristi se za analizu tijekom dana.

Volumen otopine 3 potreban za pripremu određenog volumena otopine 4 izračunava se pomoću formule

gdje je 1,2 potrebna koncentracija klora, g/dm;

Volumen otopine 3 potreban za pripremu cm otopine 4, cm;

Volumen otopine koju treba pripremiti je 4 cm;

Koncentracija aktivnog klora, g/dm.

3.2.1.5 Priprema otopine sumporne kiseline koja sadrži selen - prema 2.2.2.2.

3.2.1.6 Priprema osnovne otopine amonijevog klorida

Uzorak od 1,919 g amonijevog klorida (koji sadrži 99,5% glavne tvari) otopi se u destiliranoj vodi i otopina se namjesti na 1000 cm3 destiliranom vodom. Otopina sadrži 0,5 mg dušika po 1 cm3.

3.2.1.7 Priprema referentnih otopina i izrada kalibracijske krivulje

Uzeti osam numeriranih odmjernih tikvica obujma 100 cm3 i iz birete obujma 50 cm3 izliti volumene glavne otopine navedene u tablici 1. Zatim se u svaku tikvicu doda destilirana voda do polovice njenog volumena i doda se 3 cm koncentrirane sumporne kiseline koja sadrži selen, pripremljene prema 2.2.2.2, i promiješa. Nakon hlađenja, dovedite volumene otopina do oznake destiliranom vodom i ponovno promiješajte.

stol 1

Broj boce	Volumen glavne otopine, cm

Prije početka svakog ispitivanja, za izradu kalibracijske krivulje, iz svake tikvice referentne otopine uzme se 0,5 cm otopine i stavi u numeriranih osam čaša kapaciteta 100 cm, zatim se u svaku čašu doda 50 cm otopine 2, pomiješano i dodano je 2,5 cm otopine 4, ponovno promiješajte i ostavite otopine 1 sat na sobnoj temperaturi za potpuni razvoj boje.

Optička gustoća otopina mjeri se u odnosu na prvu referentnu otopinu, koja ne sadrži dušik, u kivetama s debljinom prozirnog sloja od 10 mm, pomoću crvenog filtra s maksimalnim prijenosom od 620-670 nm.

Na temelju rezultata fotometrije referentnih otopina konstruira se kalibracijski grafikon, iscrtavajući na apscisnoj osi vrijednosti sadržaja dušika u miligramima u 100 cm referentnih otopina, a na ordinatnoj osi - pokazatelje optičke gustoće rješenja.

3.3 Izvedba testa

3.3.1 Priprema mineralizata

U dugačku suhu epruvetu koja slobodno ulazi u grlo tikvice otporne na toplinu ili u cijev za izgaranje, izvažite 0,2-0,3 g ispitnog uzorka hrane. Umetnuvši epruvetu s uzorkom u tikvicu ili u cijev za izgaranje do njenog dna, izlijte uzorak i ponovno izvažite epruvetu. Razlika između prvog i drugog vaganja služi za određivanje mase uzorka uzetog za analizu. Dodajte 2 cm 30% otopine vodikovog peroksida u uzorak. Nakon 1,5-2 minute dodajte 3 cm koncentrirane sumporne kiseline koja sadrži selen i lagano protresite. Epruvete ili tikvice postupno se zagrijavaju na 340-380 °C. Mineralizacija uzoraka se nastavlja sve dok otopina potpuno ne promijeni boju. Ako nakon 1,5-2 sata ne dođe do promjene boje, otopina se ohladi na 60-80 °C, doda se 1 cm vodikovog peroksida i kuha dok potpuno ne promijeni boju.

Nakon obezbojenja, otopina se ohladi, kvantitativno prenese u odmjernu tikvicu, namjesti na 100 cm destiliranom vodom i promiješa. Dopušteno je provoditi mineralizaciju u kalibriranim epruvetama.

3.3.2 Fotometrijsko određivanje dušika u mineralizatima

Za određivanje dušika, 0,5 cm mineralizata pripremljenog prema 3.3.1. se pipetom ili štrcaljkom za doziranje uzme u konusnu tikvicu ili čašu kapaciteta 100 cm, doda se 50 cm otopine 2 i pomiješa, zatim doda s pipetom ili štrcaljkom za doziranje 2,5 cm otopine 4, ponovno promiješajte i ostavite otopinu 1 sat na sobnoj temperaturi da se boja potpuno razvije.

Optička gustoća otopina mjeri se u odnosu na referentnu otopinu koja ne sadrži dušik, u kivetama s debljinom prozirnog sloja od 10 mm, pomoću crvenog filtra s maksimalnim prijenosom od 620-670 nm.

Ako očitanje instrumenta za ispitnu otopinu prelazi očitanje osme referentne otopine, tada se početna otopina mineralizata pripremljena prema 3.3.1. razrijedi prvom referentnom otopinom do optimalne koncentracije za fotometriju (optička gustoća 0,2-0,8).

Istodobno se provodi kontrolni pokus radi provjere kontaminacije vode i reagensa amonijakom, isključujući uzimanje uzorka hrane za životinje.

3.4 Obrada rezultata

3.4.1 Maseni udio dušika () kao postotak u ispitnom uzorku izračunava se pomoću formule

,

gdje je sadržaj dušika u uzorku (u 100 cm3 otopine), nađen iz kalibracijske krivulje, mg;

Sadržaj dušika u 100 cm3 otopine kontrolnog pokusa, utvrđen iz kalibracijske krivulje, mg;

Težina uzorka, mg.

Ako je početna otopina mineralizata bila razrijeđena prije analize, dobiveni rezultat se povećava za isti iznos za koji je bila razrijeđena originalna otopina.

Kao konačni rezultat ispitivanja uzima se aritmetička sredina rezultata dva paralelna određivanja. Rezultati se izračunavaju na treću decimalu i zaokružuju na drugu decimalu.

3.4.2 Dopuštena odstupanja između rezultata dva paralelna određivanja () i između dva rezultata dobivena u različitim uvjetima () (u različitim laboratorijima, u različito vrijeme, pri radu na različitim instrumentima itd.), s razinom pouzdanosti =0, 95 ne smije prelaziti sljedeće vrijednosti:
________________
* Nedostatak originala. - Bilješka.

3.4.3 Maseni udio dušika u suhoj tvari izračunava se prema 2.4.4.

3.5 Maseni udio sirovih bjelančevina u ispitnom uzorku ili u suhoj tvari izračunava se prema 2.5.

PRIMJENA
(potreban)

Određivanje sadržaja dušika i proračun sadržaja sirove tvari
protein (ISO 5983-79)*

________________
* U Ruskoj Federaciji, vidi GOST R 51417-99.

Standard se koristi u operacijama uvoza i izvoza za kontrolu kvalitete stočne hrane na temelju sadržaja dušika i sirovih bjelančevina.

1 Definicija

Ova međunarodna norma utvrđuje Kjeldahlovu metodu za određivanje sadržaja dušika u hrani za životinje i metodu za izračunavanje sadržaja sirovih bjelančevina.

2 Opseg primjene

Metoda ne razlikuje proteinski i neproteinski dušik. Ako je potrebno određivanje sadržaja neproteinskog dušika, moraju se koristiti odgovarajuće metode. U nekim slučajevima ova metoda ne otkriva u potpunosti nitratni i nitritni dušik.

Poljoprivredno prehrambeni proizvodi. Opće upute za određivanje dušika Kjeldahlovom metodom.

4 Načelo

Razgradnja organske tvari sumpornom kiselinom u prisutnosti katalizatora, oslobađanje produkta reakcije s lužinom, destilacija i titracija oslobođenog amonijaka. Izračunajte sadržaj dušika i pomnožite rezultat s faktorom 6,25 kako biste dobili sadržaj sirovih bjelančevina.

5 Reagensi

Svi reagensi moraju biti čisti za analizu. Voda koja se koristi mora biti destilirana ili voda iste čistoće.

Svi reagensi, osim standardnih uzoraka (5.6.), ne bi trebali biti praktički slobodni od dušikovih spojeva.

5.1 Kalijev sulfat.

5.2 Katalizator.

Upozorenje. Skreće se pozornost na toksičnost živinih spojeva. Moraju se poduzeti sve mjere opreza. Otopine koje sadrže živu ne smiju se izlijevati izravno u odvodni sustav, već ih treba prikupiti za naknadnu obradu.
, standardna titrirana otopina ili

8 Izvođenje testa

8.1 Preuzimanje trzaja

Izvažite uzorak uzorka koji sadrži 0,005-0,08 g dušika s točnošću od 1 mg. Masa uzorka treba biti između 0,5 i 2,0 g (po mogućnosti 1,0 g).

Bilješka. Kada je, zbog heterogenosti uzorka, težina uzorka veća od gore navedene i stoga će očekivani sadržaj dušika premašiti 0,08 g, povećajte volumen sumporne kiseline u prihvatnoj tikvici u skladu s tim (vidi 8.2.2) ako se sumporna kiselina koristi kao primanje tekućine .

8.2 Definicija

Upozorenje! Naknadne radnje treba izvoditi pod dobro prozračenim poklopcem ili u dimnjaku.

8.2.1 Razgradnja organske tvari

Uzorak za ispitivanje kvantitativno se prenese u Kjeldahlovu tikvicu odgovarajućeg kapaciteta (obično 800 cm3). Dodati kalijev sulfat (5.1.). Ako se kao katalizator koristi živa ili živin(II) oksid, dovoljno je 10 g sulfata. Kad je katalizator bakrov(II) oksid ili bakrov(II) sulfat pentahidrat, potrebno je 15 g kalijevog sulfata.

Dodajte odgovarajuću količinu katalizatora: 0,65 g (1 kap) žive (5.2.1) ili 0,7 g živinog(II) oksida (5.2.2) može se koristiti za sve proizvode. Umjesto toga može se koristiti 0,3 g bakrova (II) oksida (5.2.3) ili 0,9-1,2 g bakrova (II) sulfata pentahidrata (5.2.4). Utvrđeno je da je za potpunu detekciju dušika potrebno dulje izgaranje.

Bilješka. Kada se analiziraju proizvodi s visokim sadržajem dušika, živa je poželjan katalizator.

Dodajte 25 cm sumporne kiseline (5.3.) za prvi gram suhe tvari uzorka i 6-12 cm za svaki dodatni gram suhe tvari (oko 6 odnosno 12 cm kiseline potrebno je za sagorijevanje škroba i masti). Temeljito promiješajte kako biste potpuno navlažili uzorak. Najprije se tikvica umjereno zagrije kako bi se spriječilo da se pjena podigne do grla tikvice ili da ne izbaci iz tikvice.

Bilješka. Preporučljivo je dodati sredstvo protiv pjenjenja kao što je parafinska smola (5.4).

Umjereno zagrijavati uz povremeno okretanje dok masa ne pougljeni i pjena nestane. Zatim se zagrijavanje pojačava dok se ne uspostavi ravnomjerno vrenje. Zagrijavanje je dovoljno ako se kipuća kiselina kondenzira u sredini grla Kjeldahlove tikvice. Izbjegavajte pregrijavanje stijenki tikvice koje nisu u dodiru s tekućinom. Ako se koristi otvoreni plamen, takvo se pregrijavanje može spriječiti stavljanjem tikvice na azbestnu ploču s rupom nešto manjeg promjera od promjera tikvice na razini tekućine.

Tijekom zagrijavanja tikvicu treba postaviti nagnutu pod kutom od 30-45° u odnosu na okomicu.

Nakon bistrenja tekućine zagrijavanje se nastavlja 1 sat ako se koristi živin katalizator ili 2 sata ako se koristi bakreni katalizator.

Ostaviti da se ohladi. Ako se hladni mineralizat skrutne, preporuča se koristiti veći volumen kiseline za izgaranje od gore navedenog.

8.2.2 Uklanjanje amonijaka

Pažljivo dodajte 250-350 cm vode da se sulfati potpuno otope, miješajte kružnim pokretima i ostavite da se ohladi. Dodajte malo sredstva protiv plamenjače (5.13). Pipetom se u prihvatnu tikvicu aparature za destilaciju prenese 25 cm otopine sumporne kiseline (1/2 HSO) = 0,05 ili 0,125 mol/dm (5.9.1). Koncentracija kiseline odabire se ovisno o očekivanom sadržaju dušika u uzorku (napomena uz točku 8.1), dodajte 100-150 cm3 vode i nekoliko kapi miješanog indikatora (5.11).

Vrh cijevi hladnjaka uroni se u tekućinu koja se nalazi u prihvatnoj tikvici do dubine od najmanje 1 cm. Polagano se 100 cm otopine natrijevog hidroksida (5.7.) uvodi duž stijenki u Kjeldahlovu tikvicu.

Bilješka. Ako je korišteno više sumporne kiseline (5.3.) nego što je navedeno (8.2.1., zadnji odlomak), volumen natrijevog hidroksida mora se proporcionalno povećati.

Ako su se kao katalizator koristili živini spojevi, otopina natrijevog hidroksida pomiješa se s 25 cm3 otopine tiosulfata (5.8.1.) prije dodavanja u tikvicu.

Bilješka. Ako se dodaje zasebno, tiosulfat može reagirati s kiselinom u tikvici i formirati sumporovodik, uzrokujući iskrivljene rezultate. Umjesto tiosulfata može se koristiti hipofosfit (5.8.2). U tom slučaju nema opasnosti od stvaranja sumporovodika. 1 g hipofosfita, dodan u krutom obliku nakon razrjeđivanja s vodom prije dodavanja lužine, dovoljan je za taloženje 1 g žive.

Tikvica se odmah spoji na aparaturu za destilaciju i zagrijava takvim intenzitetom da se prikupi 150 cm destilata u 30 minuta. Nakon toga pomoću lakmus papira (5.12.) provjerite pH destilata na vrhu cijevi kondenzatora. Ako je reakcija alkalna, nastaviti destilaciju.

Vrh cijevi kondenzatora odmah se uklanja iz kondenzatora nakon završetka destilacije kako bi se spriječilo ponovno usisavanje. Ako tijekom destilacije sadržaj prihvatne tikvice postane lužnat, određivanje se ponavlja uz odgovarajuće izmjene. Kod destilacije amonijaka u bornu kiselinu, 100-250 cm3 otopine borne kiseline (5.9.2.) ulijeva se u prihvatnu tikvicu aparata za destilaciju.

8.2.3 Titracija

Ako je kao apsorbirajuća tekućina korištena sumporna kiselina, njezin se višak titrira otopinom natrijevog hidroksida (NaOH) = 0,1 ili 0,25 mol/dm (5.10.1.) dok ljubičasta boja ne prijeđe u zelenu.

Ako je kao apsorbirajuća tekućina korištena borna kiselina, amonijak se titrira otopinom sumporne kiseline (1/2 HSO) = 0,05 ili 0,125 mol/dm (5.10.2) dok se boja otopine ne promijeni iz zelene u ljubičastu.

Ako nije moguće provesti titraciju istodobno s destilacijom, titraciju treba provesti odmah nakon završetka destilacije, pazeći da temperatura destilata ne prijeđe 25 °C. U tim uvjetima nema gubitka amonijaka.

8.3 Broj definicija

Provedite dva određivanja jednog uzorka.

8.4 Detekcija praznog mjesta

Slijepa proba se provodi korištenjem saharoze (5.5.) kao ispitnog uzorka.

8.5 Referentna vrijednost

Kontrolna analiza provodi se određivanjem sadržaja dušika u acetanilidu (5.6.1.) ili triptofanu (5.6.2.) dodavanjem 1 g saharoze (5.5.).

Izbor analita za kontrolnu analizu ovisi o tome koliko se lako ispitni uzorci pepe. Acetanilid se lako pepeli, dok je triptofan teže sagorljiv. Triptofan prije upotrebe treba osušiti.
);

0,06% - s udjelom dušika većim od 6% ().

9.2 Izračun sadržaja sirovih bjelančevina

Rezultati su izračunati s točnošću od 0,1% ().

10 Izvješće o ispitivanju

Izvješće o ispitivanju treba navesti korištenu metodu i dobiveni rezultat. Treba također navesti faktor pretvorbe (tj. 6,25) koji se koristi za pretvorbu dušika u sirove bjelančevine, kao i analitičke uvjete koji nisu specificirani u ovoj međunarodnoj normi ili se smatraju izbornim, kao i sve okolnosti koje mogu utjecati na rezultat.

Izvješće o ispitivanju mora sadržavati sve pojedinosti potrebne za potpunu identifikaciju uzorka.

Tekst dokumenta ovjerava se prema:
službena objava
Krmna smjesa. Dio 4. Hrana. Krmna smjesa.
Sirovine stočne hrane. Metode analize:
sub. GOST. - M.: IPK Izdavačka kuća za standarde, 2002

Određivanje "sirovih" proteina (prema Kjeldahl metodi)

Određivanje sirovih bjelančevina provodi se prema Kjeldahlovoj metodi pomoću makro- ili mikrometode.

Metoda se temelji na određivanju dušika, a time i sirovih bjelančevina, spaljivanjem uzorka hrane za životinje u koncentriranoj sumpornoj kiselini. Amonijak koji nastaje u tom procesu prelazi u amonijevu sol sumporne kiseline. Zatim se ta sol razgrađuje pomoću lužine, a tijekom procesa destilacije oslobođeni amonijak se hvata titriranom otopinom sumporne kiseline. Reakcije se odvijaju prema sljedećim jednadžbama: Izgaranje:

NH 2 CH 2 COOH + 3H 2 SO 4 > NH 3 +2CO 2 + 4H 2 O +3SO 2

2NH3 + H2SO4 > (NH4)2SO4

• (NH 4) 2 SO 4 + 2NaOH > 2NH 4 OH + Na 2 SO 4
• 2NH 4 OH > 2NH 3 + 2H 2 O
• 2NH3 + H2SO4 > (NH4)2SO4

Napredak odlučnosti. Oko 1 g ispitivane krmiva stavi se u epruvetu (kod mikrometode 0,1-0,3 g), izvaže na analitičkoj vagi i prenese na dno Kjeldahlove tikvice. Da biste to učinili, stavite malo gumeno crijevo na epruvetu s hranom, prinesite ga na dno prevrnute tikvice i, okrećući ga, ulijte sadržaj u tikvicu. Prazna se epruveta važe na istim vagama i iz razlike mase epruvete s hranom i prazne određuje se masa uzorka.

20 ml (kod mikrometode 5 ml) koncentrirane sumporne kiseline (iz stroja) pažljivo se ulije u Kjeldahlovu tikvicu do uzorka hrane, sadržaj se pažljivo promiješa i stavi u nagnuti položaj na grijač u komori. . Sadržaj tikvice se dovede do vrenja (u početku pažljivo, ne dopuštajući da se pjeni). Pri spaljivanju se u tikvice povremeno dodaje 3-5 ml vodikovog peroksida. Malo se ohlade prije dodavanja katalizatora. Zapalite hranu dok se ne dobije lagana otopina.

Nakon bistrenja, tekućina se ohladi, pažljivo se doda mala količina destilirane vode (100-150 ml) i ulije bez gubitka u tikvicu za destilaciju od 600-800 ml. Kjeldahlova tikvica se ispere nekoliko puta destiliranom vodom. Ukupna količina tekućine u tikvici za destilaciju ne smije premašiti polovicu volumena. Istodobno se u prihvatnu konusnu tikvicu ulije 50 ml 0,1 N otopine sumporne kiseline i 2-3 kapi indikatora metiloranža i stavi u Kjeldahlov aparat, spuštajući kraj staklene cijevi hladnjaka u kiselinu.

U tikvicu za destilaciju ubacite malo plovućca ili nekoliko komadića cinka radi ravnomjernog vrenja, uz stijenku pažljivo ulijte 80 ml 33% otopine natrijevog hidroksida (oko 4 puta više od kiseline uzete za spaljivanje uzorka, 30% - 88 ml, 40% - 66 ml), tikvica se odmah zatvori čepom s hvatačem kapi iz aparature, promiješa i stavi na grijaći plašt.

Zagrijavanjem se oslobođeni amonijak veže s 0,1 N otopinom sumporne kiseline. Amonijak se destilira sve dok kap destilacije ne prestane plaviti na crvenom lakmus papiru. Uz dobro vrenje destilacija traje 30-40 minuta.

Nakon završetka destilacije, kraj staklene cijevi hladnjaka ispere se malom količinom destilirane vode, skupljajući je u prihvatnu tikvicu. Zatim se sadržaj prihvatne tikvice titrira s 0,1 N otopinom natrijevog hidroksida pomoću indikatora metiloranža, određujući višak sumporne kiseline. Na temelju razlike između sumporne kiseline (50 ml) uzete u prihvatnu tikvicu i titrirane slobodne kiseline, određuje se kiselina povezana s amonijakom.

Pri izračunavanju sadržaja dušika u uzorku uzeti u obzir da je 1 ml 0,1 N otopine sumporne kiseline ekvivalentan 0,0014 g dušika.

Postotak dušika u zračno-suhoj tvari krmiva izračunava se pomoću formule 1.

Količina sirovih bjelančevina izračunava se množenjem sadržaja dušika s odgovarajućim koeficijentima prikazanima u tablici.

Faktori pretvorbe dušika

Koeficijenti se određuju uzimajući u obzir sadržaj dušika u bjelančevinama, koji se za stočnu hranu kreće od 13 do 19%.

Podaci o određivanju “sirovih” bjelančevina upisani su u tablicu 4.

Tablica 4 - Određivanje “sirovih” bjelančevina u hrani za životinje

Svi dokumenti predstavljeni u katalogu nisu njihova službena objava i služe samo u informativne svrhe. Elektroničke kopije ovih dokumenata mogu se distribuirati bez ikakvih ograničenja. Informacije s ove stranice možete objaviti na bilo kojoj drugoj stranici.

Krmna smjesa, krmna smjesa, sirovine krmne smjese. Određivanje masenog udjela dušika i izračunavanje masenog udjela sirovih bjelančevina. Kjeldahl metoda

Standardna oznaka:
Standardni status:	Trenutno
ruski naziv:	Krmna smjesa, krmna smjesa, sirovine krmne smjese. Određivanje masenog udjela dušika i izračunavanje masenog udjela sirovih bjelančevina. Kjeldahl metoda
Englesko ime:	Krmiva, krmna smjesa i sirovine. Određivanje masenog udjela dušika i izračunavanje masenog udjela sirovih bjelančevina. Kjeldahl metoda
Datum stupanja na snagu:	01.01.2001
Područje i uvjeti primjene:	Ova norma utvrđuje metodu za određivanje sadržaja dušika i metodu za izračunavanje sadržaja sirovih bjelančevina u hrani za životinje, krmnim smjesama i sirovinama za životinje korištenjem Kjeldahl metode.
Popis promjena:	Br. 0 od --2002-01-15 (reg. --2002-01-15) “Datum uvođenja odgođen”
Aplikacija #1:
	c=&f2=3&f1=II001&l=">OKS Sveruski klasifikator standarda c=&f2=3&f1=II001065&l=">65 POLJOPRIVREDA c=&f2=3&f1=II001065120&l=">65.120 Hrana za životinje * Mikrobiologija hrane za životinje, vidi 07.100.30 c=&f2=3&f1=II002&l=">KGS Klasifikator državnih standarda c=&f2=3&f1=II002015&l=">S Poljoprivreda i šumarstvo c=&f2=3&f1=II002015001&l=">S1 Ratarski usjevi c=&f2=3&f1=II002015001009&l=">C19 Metode ispitivanja. Pakiranje. Označavanje

Stranica 1

stranica 2

stranica 3

stranica 4

stranica 5

stranica 6

stranica 7

stranica 8

stranica 9

stranica 10

stranica 11

stranica 12

stranica 13

stranica 14

stranica 15

stranica 16

stranica 17

MEĐUDRŽAVNI STANDARD

Službena objava

Obrazac moskovskog standarda 2011

Predgovor

1 RAZVIO Gosstandart Rusije

UVODNO Tehničko tajništvo Međudržavnog vijeća za normizaciju, mjeriteljstvo i certificiranje

2 DONIJELO Međudržavno vijeće za normizaciju, mjeriteljstvo i certificiranje 21. listopada 1993.

3 Dekretom Odbora Ruske Federacije za normizaciju, mjeriteljstvo i certifikaciju od 02.06.94 br. 160, međudržavni standard GOST 13496.4-93 je izravno stupio na snagu kao državni standard Ruske Federacije od 01.01.95.

5 REPUBLIKACIJA. ožujka 2011

© Standards Publishing House, 1993 © STANDARDINFORM. 2011

Ovaj se standard ne može u cijelosti ili djelomično reproducirati, umnožavati i distribuirati na teritoriju Ruske Federacije kao službena publikacija bez dopuštenja Savezne agencije za tehničku regulaciju i mjeriteljstvo

UDK 636.085:546.17.06:006.354 Grupa C19

MEĐUDRŽAVNI STANDARD

STOČNA HRANA, KRMNA SMJEŠA, SIROVINE KRMNE SMJEŠE

Metode određivanja sadržaja dušika i sirovih bjelančevina

Sirovine stočne hrane, krmnih smjesa i stočne hrane.

Metode određivanja dušika i sirovih bjelančevina

MKS 65.120 OKSTU 9209

Datum uvođenja 1995-01-01

Ova se norma primjenjuje na sve vrste stočne hrane, krmnih smjesa i sirovina za stočnu hranu (osim mineralnog podrijetla, stočnog kvasca i nanrina) i utvrđuje titrimetrijske (ali Kjeldahl) i fotometrijske metode za određivanje dušika s naknadnom pretvorbom rezultata u sirove proteine. .

1 Uzorkovanje

2 Titrimetrijska metoda za određivanje dušika po Kjeldahlu (glavna metoda)

Bit metode je razgradnja organske tvari uzorka kipućom koncentriranom sumpornom kiselinom uz stvaranje amonijevih soli, pretvorba amonijaka u amonijak, njegova destilacija u kiselu otopinu, kvantitativno izračunavanje amonijaka titrimetrijskom metodom. te proračun sadržaja dušika u ispitivanom materijalu.

2.1 Aparatura, materijali i reagensi

GOST 24104 * s najvećom granicom vaganja od 200 g.

Laboratorijske vage 4. razreda točnosti prema GOST 24104

Sušilica za uzorke hrane marke SK-1 ili laboratorijski ormar za sušenje s pogreškom u održavanju temperature ne više od 5 °C.

Sito s rupama promjera 1 mm.

Električni grijači ili plinski plamenici.

Postrojenje tipa Kjelaal ili aparat za destilaciju amonijaka s vodenom parom (vidi slike 1 i 2).

* 1. srpnja 2002. GOST 24104-2001 stupio je na snagu. Na području Ruske Federacije na snazi ​​je GOST R 53228-2008 (u daljnjem tekstu).

Službena objava

/ - tikvica kapaciteta 1000 cm 1; 2-lijevac za kapanje kapaciteta 100 cm 5; 3 - hvatač kapljica; 4 - hladnjak; 5 - prijemna tikvica kapaciteta 250 cm 5 ; 6- stol za podizanje; 7- grijač tikvica ili električni štednjak s regulatorom temperature ili plinski plamenik

/ - prijemna tikvica; 2- hladnjak; 3- hvatač kapljica; 4 - tikvica za destilaciju; 5, 9 - lijevci; 6, 7, 8 - slavine;

10- generator pare

Kapaljka za indikator.

Instalacija za titraciju s biretom 2. klase točnosti kapaciteta 10. 25 ili 50 cm 1 2 prema GOST 29252.

Porculanski tarionik i tučak prema GOST 9147.

Kjeldaia tikvice kapaciteta 100, 250 ili 500 cm 2.

Epruvete od stakla otpornog na toplinu kapaciteta 50-100 cm 2 ili tikvice od stakla otpornog na toplinu kapaciteta 100 cm 2.

Stakleni lijevci promjera 2-3 cm prema GOST 25336 ili Kjeldahl čahure.

Konusna tikvica kapaciteta 250 cm 2 prema GOST 25336.

Mjerne tikvice kapaciteta 500 i 1000 cm 2 prema GOST 1770.

Mjerni cilindri kapaciteta 50 i 1000 cm 2 prema GOST 1770.

Pipete s podjelama kapaciteta 1 i 25 cm 2 prema GOST 29169.

Porculansko staklo kapaciteta 1000 cm 2 prema GOST 9147.

Kemijsko staklo kapaciteta 50 cm 2 prema GOST 25336.

Azbestne ploče.

Supstance. sprječavanje izbacivanja tekućine: komadići porculana, staklene kuglice. svježe kalcinirani komadići plovućca.

Koncentrirana sumporna kiselina prema GOST 4204. X. ch.. ch.d.a. i standardni titar otopine sumporne kiseline 0,05 mol/dm 2 (0,1 N.).

Bakar sulfat 5-voda prema GOST 4165. h.d.a., x. h.

Bezvodni natrijev sulfat prema GOST 4166. h.d.a.

Rektificirani etilni alkohol prema GOST 5962 *.

metil crveno.

Metil plavo ili bromokrezol zeleno.

Napomena n i s. Dopuštena je uporaba opreme, mjernog posuđa i drugih mjerila koja imaju ista ili bolja mjeriteljska svojstva.

2.2 Priprema za ispit

2.2.1. Priprema uzoraka za ispitivanje

Prosječni uzorak sijena, silaže, sjenaže, slame, zelene krme i g.i. zgnječen u komade duljine 1-3 cm; Korjenasti i gomoljasti usjevi režu se na ploške (ploške) debljine do 0,8 cm. Metodom četvrtina izdvaja se dio prosječnog uzorka čija masa nakon sušenja mora biti najmanje 50 g. Sušenje uzoraka stavite u sušionicu na temperaturu od 60-65°C do sušenja na zraku.

Nakon sušenja, zrakom osušeni uzorak melje se u laboratorijskom mlinu i prosijava kroz sito. Ostatak koji se teško usitnjava na situ nakon ručnog usitnjavanja škarama ili u mužaru dodaje se prosijanom dijelu i dobro se miješa.

Prosječni uzorak krmne smjese i sirovina za životinje melje se i prosijava bez prethodnog sušenja ili kupanja.

Uzorci pripremljeni za ispitivanje čuvaju se u staklenoj ili plastičnoj posudi s naribanim čepom (poklopcem) na suhom mjestu.

Uzorci tekuće hrane analiziraju se bez prethodne pripreme.

2.2.2 Priprema reagensa i otopina

2.2.2.1 Priprema miješanih katalizatora

Katalizator 1. Pomiješajte 10 težinskih dijelova bakrenog sulfata, 100 težinskih dijelova kalijevog sulfata i 2 težinska dijela selena, temeljito usitnite u mužaru dok se ne dobije fino zrnati prah.

Katalizator 2. Pomiješajte 10 težinskih dijelova bakrenog sulfata i 100 težinskih dijelova kalijevog sulfata, temeljito usitnite u mužaru kako biste dobili fino zrnati prah.

Pri pripremi katalizatora 1 i 2 dopušteno je zamijeniti kalijev sulfat s kalijevim persulfatom ili natrijevim sulfatom u istoj količini.

2.2.2.2. Priprema otopine sumporne kiseline koja sadrži selen

Amorfni ili mljeveni selen, u količini od 5 g na 1 dm 3 kiseline, otopi se u koncentriranoj sumpornoj kiselini u tikvici otpornoj na toplinu do promjene boje.

2.2.2.3 Priprema otopine sumporne kiseline s (] / 2 H 2 SO A) = = 0,05 mol/dm y (O, I n)

Koristi se standardni titar sumporne kiseline. Otopine se pripremaju u skladu s pravilima koja su priložena kompletu.

Dopušteno je pripremiti otopinu sumporne kiseline s ("AHjSO^ = 0,05 mol/dm 3 iz koncentrirane sumporne kiseline u skladu sa zahtjevima GOST 25794.1.

2.2.2.4 Priprema otopine borne kiseline s masenom koncentracijom od 4%

40 g borne kiseline otopi se u maloj količini tople vode uz zagrijavanje i prenese u tikvicu kapaciteta 1000 cm3. Nakon hlađenja, dovedite volumen do 1000 cm 3 vodom.

2.2.2.5 Priprema mješovitog indikatora

Prilikom titriranja koristite jedan od sljedećih indikatora:

indikator 1 - otopiti 0,20 g metil crvenog i 0,10 g metilen plavog u 100 cm 3 96% otopine etilnog alkohola:

indikator 2 - pomiješati 3 volumena 0,1% otopine bromokrezolnog zelenog u etilnom alkoholu i 1 volumen 0,2% otopine metilnog crvenog u etilnom alkoholu. Indikatore čuvati u tamnoj boci.

2.2.2.6 Priprema otopine natrijevog hidroksida s masenim udjelom od 33%

330 g natrijevog hidroksida otopi se u porculanskoj čaši u 670 cm 3 destilirane vode.

2.2.2.7 Priprema otopine natrijevog hidroksida s masenim udjelom od 40%

400 g natrijevog hidroksida otopi se u porculanskoj čaši u 600 cm 3 destilirane vode.

2.3 Izvedba testa

2.3.1 Pripremiti. ienue minera, shzata

U dugačkoj, suhoj epruveti koja slobodno ulazi u grlo Kjeldahlove tikvice. vagati 0,7-1 g hrane biljnog podrijetla, krmne smjese. 0,3-0,5 g životinjskog brašna ili 0,4-0,5 g kvasca s greškom ne većom od 0,001 g. Umetnuvši epruvetu u Kjeldahlovu tikvicu do njenog dna, izlijte uzorak i ponovno izvažite epruvetu. Razlika između prvog i drugog vaganja koristi se za određivanje mase uzorka uzetog za analizu. Mineralizacija se provodi na jedan od dva načina:

metoda 1. Dodajte 2 g miješanog katalizatora 1 ili 8 g katalizatora 2 u Kjeldahlovu tikvicu, nakon dodavanja katalizatora, pažljivo ulijte 10-12 cm 3 koncentrirane sumporne kiseline, ovisno o težini uzorka;

metoda 2. U Kjeldahlovu tikvicu kao oksidacijsko sredstvo dodati 10 cm 3 vodene otopine vodikovog peroksida masenog udjela 30%. Nakon prestanka burne reakcije dodajte istu količinu koncentrirane sumporne kiseline. Za ubrzanje izgaranja preporuča se koristiti sumpornu kiselinu koja sadrži selen, pripremljenu ali također. 2.2.2.2.

Sadržaj Kjeldahlove tikvice temeljito se izmiješa laganim kružnim pokretima, čime se osigurava potpuno vlaženje uzorka. Tikvica se postavi na grijač tako da joj je os nagnuta pod kutom od 30-45’ u odnosu na okomicu; u grlo tikvice umetne se mali stakleni lijevak ili rukavac kako bi se smanjilo isparavanje kiseline tijekom mineralizacije. U početku se tikvica umjereno zagrijava kako bi se spriječilo brzo određivanje cijena.

Prilikom zagrijavanja uzorak se povremeno promiješa okretanjem tikvice. Nakon nestanka pjene, zagrijavanje se pojačava dok tekućina ne zavrije. Zagrijavanje se smatra normalnim ako se kiselinska para kondenzira bliže sredini grla Kjeldahlove tikvice. izbjegavanje pregrijavanja stijenki tikvice koje nisu u dodiru s tekućinom. Ako se koristi otvoreni plamen, takvo se pregrijavanje može spriječiti stavljanjem tikvice na azbestnu ploču s rupom nešto manjeg promjera od promjera tikvice na razini tekućine.

Nakon što tekućina izgubi boju (blago zelenkasta boja je prihvatljiva). zagrijavanje se nastavlja 30 minuta. Nakon hlađenja mineralizat se kvantitativno prenosi u destilacijsku komoru.

tikvicu, isperite Kjeldahlovu tikvicu tri puta s 20-30 cm 3 destilirane vode. Ukupni volumen otopine u tikvici za destilaciju treba biti 200-250 cm3.

Moguće je destilirati izravno iz Kjeldahlove tikvice. U ovom slučaju za mineralizaciju se koristi Kjeldahlova tikvica kapaciteta 500 cm 3 . Prije destilacije amonijaka, mineralni lizat se razrijedi sa 150-200 cm3 destilirane vode.

Prilikom provođenja ekspresne analize u tvornicama stočne hrane i tijekom pripreme travnate hrane dopuštena je sljedeća metoda pripreme mineralizata.

Odvagani dio ispitnog uzorka mase 0,2-0,3 g stavi se u Kjeldahlovu tikvicu ili u epruvetu ili u staklenu tikvicu postojanu na toplinu. U odvaganu tikvicu dodajte 4 cm3, au epruvetu dodajte 3 cm3 vodene otopine vodikovog peroksida masene koncentracije 30%. Nakon 1,5-2 minute u tikvicu se doda 5-8 cm 3 , a u epruvetu 2 cm 3 koncentrirane sumporne kiseline koja sadrži selen, pripremljene prema 2.2.2.2. Sadržaj tikvice ili epruvete temeljito se promiješa kako bi se uzorak potpuno smočio. Tikvica ili epruveta s uzorkom stavlja se na električni grijač i zagrijava do vrenja. Zatim se povećava toplina i nastavlja se mineralizacija dok otopina potpuno ne promijeni boju (20-30 minuta). Ako otopina nije bistra, nastavite zagrijavati još 5-8 minuta ili ohladite, dodajte 0,5 cm 3 otopine vodikovog peroksida s masenom koncentracijom od 30% i kuhajte dok potpuno ne promijeni boju. Mineralizat se nakon hlađenja kvantitativno prenese u odmjernu tikvicu zapremine 100 cm 3, destiliranom vodom se dovede volumen otopine do oznake i promiješa. 50 cm 3 otopine mineralizata prenese se u tikvicu za destilaciju.

2.3.2 Destilacija i titracija amonijaka

2.3.2.1 Destilacija amonijaka u bornu kiselinu

U prihvatnu tikvicu ulije se 20 cm3 otopine borne kiseline masene koncentracije 4% i 5 kapi bilo kojeg od pomiješanih indikatora. Tikvica se ovako stavi u hladnjak. tako da se njegov vrh uroni u otopinu borne kiseline do dubine od najmanje 1 cm Hladna voda se propušta kroz hladnjak.

Tikvica za destilaciju spoji se na aparat za destilaciju amonijaka i u tikvicu s mineralizatom kroz kapajući lijevak pažljivo se ulije otopina natrijevog hidroksida masenog udjela 33%. Lijevak se ispere 2-3 puta s 10-15 cm 3 destilirane vode, ostavljajući malu količinu vode kao vodenu brtvu. Dopušteno je dodati otopinu natrijevog hidroksida prije spajanja destilacijske tikvice na aparaturu. U tom slučaju, otopina natrijevog hidroksida se ulije u tikvicu za odvajanje duž stijenke, pazeći da se ne pomiješa s mineralizatom. i odmah spojen na aparat za destilaciju amonijaka.

Volumen dodanog natrijevog hidroksida ovisi o volumenu sumporne kiseline korištene za pripremu mineralizata. Za svaki kubični centimetar sumporne kiseline koji preostane nakon završetka procesa mineralizacije treba dodati najmanje 3,5 cm 3 otopine natrijevog hidroksida s masenim udjelom od 33%. Ako je volumen preostale sumporne kiseline teško odrediti, volumen lužine izračunava se na temelju volumena sumporne kiseline uzete za mineralizaciju. Dopušteno je prethodno neutralizirati sadržaj destilacijske tikvice otopinom natrijevog hidroksida s masenim udjelom od 40%. koristeći bilo koji od indikatora. Da biste osigurali oslobađanje amonijaka, dodajte dodatnih 1 cm 3 otopine natrijevog hidroksida s masenim udjelom od 40%.

Tikvica za destilaciju zagrijava se električnim grijačem ili plinskim plamenikom. Otopina u tikvici za destilaciju zagrijava se na sljedeći način. kako bi se osiguralo ravnomjerno vrenje. Dopušteno je provoditi destilaciju vodenom parom. Kako bi se spriječilo oslobađanje amonijaka, voda u generatoru pare mora se zakiseliti sumpornom kiselinom dok ne postane ljubičasta kada se koristi indikator 1 i ružičasta kada se koristi indikator 2.

Na početku destilacije amonijaka boja otopine u prihvatnoj tikvici postaje zelena. Pri normalnom vrenju, volumen otopine u prijemnoj tikvici nakon 20-30 minuta obično je 150-200 cm3. Prilikom izvođenja ekspresne analize, vrijeme destilacije se smanjuje na 7-10 minuta. Završetak destilacije može se odrediti pomoću crvenog lakmus papira. Da bi se to učinilo, prijemna tikvica se uklanja iz aparata, nakon što je prethodno ispran kraj hladnjaka destiliranom vodom, a lakmus papir se izlaže jodu iz tekućih kapi destilata. Ako lakmus ne postane plav, destilacija amonijaka je završena. Ako lakmus postane plav, prihvatnu tikvicu ponovno staviti ispod hladnjaka i nastaviti destilaciju. Nakon završene destilacije prihvatna tikvica se spusti i kraj hladila se ispere destiliranom vodom u prihvatnu tikvicu. Titrirati amonijak iz birete s otopinom sumporne kiseline s (*/ 2 H,S0 4) = 0,05 mol/dm 3 dok se boja indikatora ne promijeni iz zelene u ljubičastu kada se koristi indikator 1 i iz zelene u ružičastu kada se koristi indikator. 2.

2.3.2.2 Destilacija amonijaka u sumpornu kiselinu

U prihvatnu tikvicu pipetom se ulije 50 cm 3 otopine sumporne kiseline (V 2 H 2 S0 4) = 0,05 mol/dm. Destilacija se provodi na način naveden u stavku 2.3.2.1. Nakon završene destilacije sadržaj prihvatne tikvice (višak otopine sumporne kiseline s (, / 2 H 2 S0 4) = 0,05 mol/dm 3) titrira se otopinom natrijevog hidroksida s (NaOH) = 0,1 mol/dm. 3 dok boja ne postane zelena.

2.3.2.3 Istovremeno s ispitivanjem provodi se kontrolni pokus na kontaminaciju vode i reagensa amonijakom, isključujući uzimanje uzorka hrane za životinje.

Volumen sumporne kiseline utrošen za titraciju u kontrolnom pokusu tijekom destilacije u bornu kiselinu ne smije biti veći od 0,5 cm3. Kod destilacije u sumpornu kiselinu, volumen otopine natrijevog hidroksida utrošen za titraciju mora biti najmanje 49,5 cm 3. Ako se prekorače utvrđeni standardi, identificiraju se i uklanjaju izvori kontaminacije reagensa amonijakom. 2.4 Obrada rezultata

2.4.1 Maseni udio dušika (A) u ispitnom uzorku kao postotak pri destilaciji amonijaka u bornu kiselinu izračunava se pomoću formule

U _ (Ux -K 0) K 0,0014 100 t

gdje je V volumen otopine sumporne kiseline utrošen za titraciju ispitivane otopine.

Y 0 je volumen otopine sumporne kiseline utrošen za titraciju u kontrolnom pokusu.

K - korekcija na tigar otopine sumporne kiseline s (7,14,50.,) = 0,05 mol/dm 3. ako nije pripremljen od standardnog titra;

0,0014 je masa dušika ekvivalentna masi sumporne kiseline sadržane u 1 cm 3 otopine s (V 2 H 2 S0 4) = 0,05 mol/dm 3; t je masa uzorka, g;

100 je faktor pretvorbe u postotke.

2.4.2 Maseni udio dušika (A) u ispitnom uzorku kao postotak pri destilaciji amonijaka u sumpornu kiselinu izračunava se pomoću formule

V- (G 0 -K,) 0,0014 100

gdje je V0 volumen otopine natrijevog hidroksida s (NaOH) = 0,1 mol/dm3. utrošeno na titraciju otopine sumporne kiseline s (72H 2 S0 4) = 0,05 mol/dm 3 u kontrolnom pokusu, cm 3; Y, je volumen otopine natrijevog hidroksida s (NaOH) = 0,1 mol/dm 3. potrošeno na titraciju sumporne kiseline u ispitivanoj otopini, cm 3;

K - korekcija na titar otopine natrijevog hidroksida s (NaOH) = 0,1 mol/dm 3 ;

0,0014 je masa dušika ekvivalentna masi sumporne kiseline sadržane u 1 cm 3 otopine s (7 2 H 2 S0 4) = 0,05 mol/dm 3; t je masa uzorka, g;

NU - faktor pretvorbe u postotak.

Napomena i s. Pri provođenju ekspresne analize dobiveni rezultat se udvostručuje, budući da se za destilaciju koristi samo polovica volumena mineralizata.

Kao konačni rezultat ispitivanja uzima se aritmetička sredina rezultata dva paralelna određivanja. Rezultati se izračunavaju na treću decimalu i zaokružuju na drugu decimalu.

2.4.3 Dopuštene razlike između rezultata dva paralelna određivanja (d) i između dva rezultata dobivena u različitim uvjetima (D) (u različitim laboratorijima, u različito vrijeme, pri radu na različitim instrumentima itd.), s razinom pouzdanosti P - 0,95 ne smije premašiti sljedeće vrijednosti:

gdje je X aritmetička sredina rezultata dvaju paralelnih određivanja, %;

* - aritmetička sredina rezultata dva ispitivanja provedena u različitim uvjetima, %.

Dopuštena odstupanja između rezultata paralelnih određivanja i ispitivanja provedenih pod različitim uvjetima mogu imati različit izraz, naveden u regulatornoj i tehničkoj dokumentaciji za ovu vrstu proizvoda.

Maksimalni sadržaj masti rezultata analize (Av) s jednostranom razinom pouzdanosti od P = 0,95 izračunava se pomoću formule

Av = a051 + 0,028*.

Maksimalna pogreška rezultata analize koristi se pri ocjeni kvalitete hrane za životinje.

Dopušteno je provoditi analizu bez paralelnih određivanja ako u seriji uzoraka koji se proučavaju postoje standardni uzorci (RM). U tom slučaju (uz obveznu selektivnu statističku kontrolu konvergencije paralelnih određivanja), rezultat jednog određivanja uzima se kao rezultat ispitivanja ako razlika između masenog udjela dušika (D) reproduciranog i certificiranog u referentnom standardu ne odgovara premašiti

D = 0,06+0,033* arr ,

gdje je X. lth certificirana vrijednost komponente koja se utvrđuje, preuzeta iz potvrde za RM, %.

Kontrolne analize uzoraka pokusne serije i analize RM provode se u skladu s odobrenom znanstveno-tehničkom dokumentacijom.

2.4.4 Maseni udio dušika u suhoj tvari (L*,) kao postotak izračunava se pomoću formule

gdje je X maseni udio dušika u ispitivanom uzorku. %;

W je maseni udio vlage u ispitnom uzorku, %.

2.5 Maseni udio sirovih bjelančevina u ispitnom uzorku (* 2) ili u suhoj tvari (*,) kao postotak izračunava se pomoću formule

ZD) = 6,25AW,).

gdje je 6,25 faktor pretvorbe ukupnog sadržaja dušika u sirove bjelančevine:

X je maseni udio dušika u ispitnom uzorku. %;

L" - maseni udio dušika u suhoj tvari,%.

3 Fotometrijska inlofenolna metoda za određivanje dušika

Bit metode je probaviti organsku tvar uzorka koncentriranom sumpornom kiselinom uz stvaranje amonijevih soli i naknadno fotometrijsko određivanje dušika u obliku obojenog indofenolnog spoja, nastalog u alkalnom okruženju u interakciji sa salicilatom i natrijev hipoklorit i ima maksimalnu apsorpciju svjetla na 655 nm. Koncentracija dušika u fotometriranim otopinama treba biti 0,01-0,14 mg/cm3.

3.1 Aparatura, materijali i reagensi

Laboratorijske vage 2. razreda točnosti u skladu s GOST 24104 s maksimalnom granicom vaganja od 200 g ili slične po točnosti i laboratorijske vage 4. klase točnosti u skladu s GOST 24104 s maksimalnom granicom vaganja od 500 g ili druge vage iste klase točnosti.

Mlinac za uzorkovanje biljaka IPR-2.

Rezač slame marke ISR-1 ili drugih marki.

Sušilica za uzorke hrane marke SK-1 ili laboratorijski ormar za sušenje s pogreškom u održavanju temperature ne više od 5 °C.

Laboratorijski mlin marke MRP-2 ili drugih marki.

Sito s rupama promjera 1 mm.

Fotoelektrokolormegr. ima svjetlosni filter s maksimalnim prijenosom svjetlosti u području od 620-670 nm.

Električni grijač s temperaturom grijanja od 350-400 "C ili plamenici za bazene.

Gumena žarulja.

Epruvete od stakla otpornog na toplinu kapaciteta 50-100 cm 3 ili tikvice od stakla otpornog na toplinu kapaciteta 100 cm 3.

GOST 4328.

3.2 Priprema za test - ali 2.2.1.

3.2.1 Priprema otopina

3.2.1.1 Priprema otopine J

57 g nafijeve salicilne kiseline, 17 g kalijevog natrijevog tartarata i 27 g natrijevog hidroksida otopi se u 700 cm3 destilirane vode. Otopina se kuha oko 20 minuta kako bi se uklonili tragovi amonijaka. Nakon hlađenja u dobivenu otopinu doda se 0,4 g nafijevog nitroprusida i destiliranom vodom dovede volumen do 1 dm 3 . U dobro zatvorenoj boci reagens se može čuvati u hladnjaku do 1 mjeseca.

3.2.1.2 Priprema otopine 2

U 50 cm 3 otopine 1 dodajte 400 cm 3 destilirane vode i 10 cm 3 otopine natrijevog hidroksida s (NaOH) = 2 mol/dm 3. zatim dodati 1 g filona B. Otopina se priprema na dan analize.

3.2.1.3 Priprema otopine 3

150 g izbjeljivača pomiješa se u čaši zapremine 500 cm 3 s 250 cm 3 destilirane vode. U drugoj čaši otopi se 105 g natrijeva karbonata u 250 cm 3 destilirane vode. Obje otopine se ocijede uz stalno miješanje. Masa se prvo zgusne, a zatim ukapi. Suspenzija se ostavi da se taloži 1-2 dana, zatim se bistra tekućina ocijedi i dekantira kroz papirnati filter.

U otopini 3 određuje se koncentracija aktivnog klora. Da biste to učinili, 1 cm 3 prozirne filtarske otopine 3 razrijedi se u konusnoj tikvici kapaciteta 100 cm 3 destiliranom vodom do 40-50 cm 3, 2 g kalijevog jodida i 10 cm 3 1 mol/dm. Doda se 3 otopine klorovodične kiseline. Dobiveni jod titrira se otopinom natrijevog tiosulfata s (Na 2 S,0) 5H:0) = 0,1 mol/dm 3, pripravljenom iz standardnog titra, do nestanka boje trešnje.

Koncentracija aktivnog klora (c), g/dm 3, izračunava se po formuli

c = 0,00355 V 1000.

gdje je V volumen otopine natrijeva tiosulfata s (Na 2 S 2 0 3 - 5H 2 0) = 0,1 mol/dm 3, koji se koristi za tifeniranje 1 cm 3 otopine 3, cm 3;

0,00355 - masa klora koja odgovara 1 cm 3 otopine natrijevog tiosulfata s (Na 2 S 2 0 3 5H 2 0) = = 0,1 mol/dm 3, g;

1000 je faktor konverzije.

Otopina 3 čuva se u tamnoj staklenoj boci u hladnjaku do 1 godine.